Ligation

質問

大学の実習でトランスフォーメーションの実験があったのですが、ligationの際のベクターとインサートDNAのモル比というのはどのように求められるのですか？
分子量とかは関係ないのですか？

色々とネットで検索してみたのですが計算の考え方が載っていませんでしたのでどなたか教えて下さい。

回答No.1

geneticist12

ヌクレオチドの平均分子量は約330です。
1塩基対あたり660になります。

660 x 塩基対数(bp) = DNA断片の分子量
DNAの重量（g)　÷　DNA断片の分子量 = DNA断片のモル数（mol)
です。

たとえば1 kb（1000 bp）のDNAの分子量は
660 x 1000 = 6.6 x 10^5

これが10 ng（10 x 10^-9 g）あるとモル数は
(10 x 10^-9 g) ÷（6.6 x 10^5）= 1.7 x 10^-12 mol= 1.7 pmol

です。

分子量とDNAの長さは比例しますから、単にインサート：ベクター比を求めるだけなら、

インサートの重量/長さ：ベクターの重量/長さ

になります。

お礼

親切なご回答ありがとうございました。