DNAのCyDye標識

質問

mRNAからcDNAを作製し、このcDNAをアマシャムから出ているキットで、CyScribe Direct mRNA Labelling KitというものをつかってCｙ3の蛍光標識したいのですが、うまく標識できません。
アマシャム的にはこのキットでcDNAやDNAラダーも、プロトコール通りにすれば標識出来る、との事なのですが、いまいちどの様にしてcDNAに標識されていっているのかもわからず（mRNAラベリング用なのに、DNAに標識出来る？）、解決方法さえも全く浮かばない状況です。
私の勉強不足なのですが、もし何かいい解決方法など、アイディアがありましたらぜひ教えて下さい。よろしくお願い致します。

回答No.1

MIYD · ベストアンサー

使ったことはありませんし、今メーカーのサイト(USの方)にアクセスできないため、
マニュアルがダウンロードできないのでわかりませんが、
CyScribe cDNA Post Labelling Kitや
CyScribe First-Strand cDNA Labelling Kit
ではなくて
CyScribe Direct mRNA Labelling Kit
がcDNAを標識できるのですか。

とりあえずグアニンに標識するらしいのでできないことは無いのでしょうが、確認できません。

付属のControl mRNAはポジコンにするためだと思いますが、
それも標識されないのですか。

mRNAの精製やcDNAの合成、その後の処理(RNaseH処理など)はメーカー推奨のキット、方法を使っているのでしょうか。

アマシャムのサポートは結構いいので、
そのときの操作や条件（上に書いたようなことも含めて）
をまとめて、
サポートに相談するのが一番いい解決法だと思います。
高い試薬なので、電話やメールで対応しきれない場合は
多分アマシャムの人が来てくれると思います。