リアルタイムPCR

質問

リアルタイムPCRの前に遠心分離機にかけるのは
どのような理由で行われるのですか教えてください。

回答No.3

methyl · ベストアンサー

マニュアルにあると思いますが、遠心する目的はチューブの底部にsampleを集めるためです。通常の制限酵素処理のような酵素処理とは異なり、PCRでは高温で反応させるため、sample内で熱対流が十分に起こります。そのため、事前によく混和しなくても、遠心で底部に集めておけば十分です。
Realtime PCRは現在ほとんどが、ABIかRocheですが、ABIであれば上記のような理由になります。Rocheですと、#2の方のおっしゃるようなことですね。Realtime PCRではミネラルオイルは使用せず、また気泡もよほどひどくなければ熱をかけたさいに除かれます。

回答No.2

taqz

私が行っているリアルタイムPCRでは、template とそれ以外の反応液を別々にアプライするため、これらをmixし、キャピラリー内に入れるために遠心しています。参考になりますでしょうか。

回答No.1

AUGQX-MAN

（１）ミネラルオイルをしっかりかぶせて、サンプルの蒸発を防止する。
（２）サンプルの中に残っている気泡を追い出す。
（３）サンプルをチューブの底部に集中させる。

という目的があるのではないでしょうか。