RT-PCRとリアルタイムPCRについての質問

質問

RT-PCRとリアルタイムPCRについての質問です。
RT-PCRでmRNAの発現量が定量し辛い場合、リアルタイムPCRの
方が、より正確に定量できたりするのでしょうか？
RT-PCRだとバンドが薄すぎて、定量しにくい！けど、リアルタイム
PCRだと、サンプル間での定量の差が明らかにわかる！って
ふうにできないのでしょうか？？

回答No.3

noname#160718

正確には「リバース」では定量はしませんよね。リバースした後のＰＣＲで定量をしてきたわけです。リアルタイムＰＣＲ以前は。
　リアルタイムＰＣＲ以前にも定量ＰＣＲはいろいろコンペティティブＰＣＲとか、いろいろあったことはあったのですが、簡便さと何より精度の点でリアルタイムＰＣＲが優れています。

　ま、「リアルでやり直せ」と言われても、機械を持っていなければどうにもなりませんし、リアルタイムの系を造るのも口で言うほど簡単ではないのですが。スタンダードも造らなきゃならないし。
　既にpublicになっている系が存在して、スタンダードも分与してもらえたりするのなら、あとは試薬買って機械さえあれば明日にでもできますけどね。
　そういう文献がなければ、リアルタイムで○□遺伝子の定量系を造る、というのが１本のペーパーになるでしょ。
　だったらRT-PCRで定量した投稿を受けてもらえる雑誌に投稿先を替えた方が、よほど話が早い気もします。

回答No.2

tomoyaok

知り合い談。
リバースで定量結果を投稿したら
リアルでやり直せって、レビュアーに言われた。
らしいです。

お礼

まじですか！？
貴重なご意見ありがとうございます。
やはりリバースで定量は厳しいみたいですね。
かなり参考になりました。

回答No.1

MIYD

"RT-PCR"はreverse taranscription PCRの意味で書かれているのでしょうか。

そうであれば、"RT-PCR"に定量性はありません。
やるとしても半定量RT-PCRになりますので、リアルタイムPCRの法が定量性は高いです。

"RT-PCR"をReal Time PCRの意味で書かれているのでしたら、リアルタイムPCRの表現の違いだけです。

お礼

ご回答ありがとうございます。
RT-PCRは、reverse transcription PCRの意味で
書きました。RT-PCRではよく考えると定量できない
ですね。リアルタイムの方が定量性が高いことが
わかって、助かりました。
ありがとうございました！！