※ ChatGPTを利用し、要約された質問です(原文:タンパク質とリガンドの複合体形成、解離)
タンパク質とリガンドの複合体形成、解離
このQ&Aのポイント
タンパク質とリガンドの複合体形成、解離についての問題があります。
与えられた問題において、タンパク質と放射標識したDNAの複合体形成、解離定数を求めるための計算方法について困っています。
さらに、電気泳動を行った後のDNAおよびタンパク質の分布を表すグラフの書き方にも悩んでいます。
大学の講義で次の内容の課題をだされましたが、全くわかりません。この問題を解くヒントや、考え方のどこが間違っているのかを教えていただけると助かります。
問題
タンパク質と32Pで放射標識したDNAとを10分間混合後、電気泳動し、タンパク質(E)、DNA(S)の解離定数Ksを求めた。
K1=10^7M^-1s^-1 Ks=1pM(k-1=10^-5s^-1)
=1nM(k-1=10^-2s^-1)
=1μM(k-1=10^1s^-1)
=1mM(k-1=10^4s^-1)
それぞれの場合、タンパク質の濃度1mM、リガンドとしてのDNAの濃度1mMで10分間混合後、電気泳動を1時間行ったときの、電気泳動したレーン方向のDNAおよびタンパク質の分布をグラフにせよ。
この問題で、私はKs=1pMのとき、Ks=[E][S]/[ES]を利用して[ES]=10^6Mとなってしまいました。このとき、[E],[S]は1mMを利用して計算してきました。これだと、[ES]がタンパク質とリガンドの濃度を超えてしまっていておかしいと思うのですが、どこを考え直せばいいのかわかりません。[ES]が適切な値がでれば、[ES]=[ES]0×exp(-k-1×t)から、電気泳動開始t秒後に複合体として残っている濃度が求めれそうなんですが。電気泳動開始t秒後に複合体として残っている濃度の求め方はヒントとして与えられていました。
また、この問題ではグラフを書くのですが、どのようなグラフをかけばいいのかがわかりません。
ご指摘お願いします。
お礼
回答ありがとうございます。参考にさせていただきます。