グルタミン酸のHPLC分析
こんにちは、昨日電話で問い合わせた伊藤と申します。
現在、HPLCによりグルタミン酸の定量分析を行おうとしています。
グルタミン酸一種類のみを分析したいのです。
そこで、陽イオン試薬IPCCをもちいて、イオン対クロマトグラフィーで分析しています。(試薬はSodium 1-Pentafluonateで濃度5mMです。)
溶離液として、アセニトニトリル/リン酸緩衝溶液(pH=2.5)で行っています。IPCCがアセニトニトリルに溶けなかったので、リン酸にだけ溶かしています。
イソクラティックでアセニト/リン酸をそれぞれ割合を変え、分析を行いましたが、出てきませんでした。
UV波長を210~230nmの範囲で変えていっても、同じ結果でした。
グルタミン酸濃度は100~500ppmで行い、HPLCに打ち込む量は10μlです。
HPLCカラムはイナートシルのODS250*4.6mmのを使用しています。
以上の実験方法で分析しましたが、分析できず本当に今困っています。
この文章を読まれて、なにかおかしい点やアドバイスありましたら、いただけないでしょうか?
本当に困ってます。