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細胞分画で何故核だけ...
マウス肝臓で、細胞分画をしました。 SSCを加えた後、ワーニングブレンダーでホモジナイズした後、遠心分離を行いました。 細胞分画では、核が一番先に沈殿し...ということは 分かるのですが、核のみが白い沈殿を作り、 他の細胞質はSSCになじむのでしょうか? 核は親水性だと思うので、まじりそうな気がして 頭が混乱しててよくわからない文章になっているかも しれません。 回答よろしくおねがいします。
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- MIYD
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回答No.1
SSCではやったことはありませんが、 核は比重が大きいので、軽く遠心すると最初に落ちます。 壊れていない細胞も同時に落ちてきます。 他の細胞内小器官は落ちるのが遅いために核が主成分のペレットが出来ます。 十分に時間とgをかければ、ミトコンドリアや他の小器官も落ちてきます。 脂質二重膜で覆われた小器官は水溶液中でそれなりに安定で、界面活性剤などを使わないとあまり溶けません。 もう少しきれいに分けたいときには、スクロースなどの比重の大きい溶液の上にホモジナイズ後のサンプルを乗せて、核以外の軽い細胞内小器官が落ちないようにしたりもします。