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※ ChatGPTを利用し、要約された質問です(原文:制限酵素の仕方)
制限酵素処理の方法について
このQ&Aのポイント
- プラスミドの制限酵素処理について質問です。現在、50マイクロリットルの滅菌水に溶けたプラスミドを二つの制限酵素で切断し、ゲル抜きしたいのですが、反応系の量についてよく分かっていません。
- 100マイクロリットルの反応系を作りたいと考えていますが、正しい量なのか不安です。特にbufferの量について教えていただきたいです。
- 使用する物質の量を以下に記します。プラスミド:50マイクロリットル、EcoR1とXho1用の10×buffer:10マイクロリットル、制限酵素EcoR1:5マイクロリットル、制限酵素Xho1:5マイクロリットル、滅菌水:30マイクロリットル。合計は100マイクロリットルです。
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それであっていますよ。 ただ制限酵素が全体の10%というのは少し多い気がします。 ちょっとうるおぼえなのですが 溶液の10%が上限(多いとスター活性がでやすい)という話を聞いたことがあるので 酵素の割合を少し減らして反応時間を少し伸したほうがいいかもしれません。
お礼
ありがとうございます。うまくいきました。