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cDNAライブラリーの作製
直径100μl程度の卵10個程度を元に cDNAライブラリーを作製したいと考えているのですが、 この場合既存のキットを元に作製することは不可能でしょうか?
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- Penfield
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回答No.1
どこから質問者さんがcDNAライブラリーの作製が不可能だと思わせているのかがわかりません。 結論から言うと、可能だと思います。 まず、RNAの精製は、問題なくできると思います。 卵の大きさも直径100μl(μm?)一般的な培養細胞とかわりないようですし。 まあ、何か殻があるのなら、それを壊す処理はしなくてはいけませんが。 RNAが精製されれば、RT-PCRのキットを使えば、cDNAはできるはずです。 一番の問題はmRNAの量かもしれませんが、最近のキットは試したことはありませんが、1個からでも問題ないみたいですし。 ただ、効率は悪くなるとは思いますが。 もし卵10個を用意するのが難しいのなら、キットを買った会社に、効率などで気をつけるべき点を、聞けば答えてくれると思います。 参考URLにマイクロアレイ用ですが、細胞1つからのmRNAを増幅できるという紹介を載せておきます。