PCRで鋳型が混ざっているとき

質問

いつもお世話になっております。
PCRで、鋳型が複数混じっているとき、増幅反応後の増幅物の内訳ってどのようになっているのでしょうか。
最初が１：１：１とかで3種類混じっているとして、増幅後に100万:100万:100万になっているものですか？
たまたまよく増えたものが指数関数的に増え始めて100万:1000:1とかになることはないのでしょうか？
逆に1000：10：1とかの鋳型を増幅したらどうなるのでしょうか。
環境サンプルのクローン解析などで、増幅物から100種類くらいの比を出しますけど、あれだってサイクルを限界まで増やしてもすべてが単一でやった時の限界まで増えるわけではありませんよね。

多色蛍光のリアルタイムPCRなどでわかるような気もするのですが、実際のデータをご存知でしたら教えてください。
理屈の上ではTm値などを考えなければ最後まで対数で等比であるはずというのはわかります。
実際のデータや検証した論文とかがあったら教えてください。

回答No.2

negigi · ベストアンサー

あー、なんとなく聞きたいことが分かった気がします。

濃度既知の複数プラスミドの溶液に、対応するプライマーを入れて、Taqman probeで個々の立ち上がりを観察することはできると思いますが、論文は知らないです。やってる人いるんでしょうか。

混ぜてないサンプルであれば、検量線用のサンプルについて、プライマーごとで、同じ濃度でも増幅曲線の立ち上がりのタイミングがズレることはありますが、それとは違いますよね。

お礼

ありがとうございました。
自分でも調べてみたいと思います。

回答No.1

negigi

リアルタイムPCRが出てくる前の、いわゆる半定量PCRがまさしくそれなんですが・・・＾＾；
古い論文なんかで見たことないですかね？

お礼

半定量PCRですか。知りませんでした。調べてみたいと思います。
ありがとうございました。

ただ、古い論文といわず、現在の内標付きの定量PCRでもそのような手法を使っているものはあるかとは思います。
わたしとしては、理屈は一応分かっているので、それをデータ取りに利用しているようなものではなく、その手法自体を検証した論文があったら読みたいと考えておりました。