免疫組織化学法とハイブリダイゼーション

質問

免疫組織化学法をin situ ハイブリダイゼーションと比べまとめたいと思うのですが、両者の違いとはなんでしょうか。
両方使う実験もあるようですが、具体的に免疫組織化学法の長所（欠点）を教えていただけたら幸いです。

回答No.1

nbyabya · ベストアンサー

免疫抗体染色（IHC）だと、蛋白質の細胞内の局在が分かります。それに対してin situ hybridization（ISH)だと、その蛋白質の細胞内の局在ははっきりしません。また、ISHだとmRNAの発現はわかりますが、本当に蛋白質としてその細胞に発現しているかはわかりません。一方、ISHだと、例えば脳内のどのニューロンがその蛋白質を発現しているのか？を見分けるのは適しています。IHCだと、膜蛋白質などだと（細胞種特異性が低いとき）どの細胞が発現しているのかよくわからないことがあります。
　一方、IHCだと市販品で使える抗体があれば楽ですが、もしないならば誰かから譲ってもらわなければなりませんし、自分で抗体を作ろうとすると（モノクロ、ポリクロにしろ）とても大変です。一方ISHだと、プローブに使う配列が先行論文等ではっきりしていればプローブの作成そのものは簡単です。
　染色そのものに関しては、一般的にはIHCの方が手間が少ないので成功しやすいでしょう。時々特殊な固定法を用いないと上手く行かないことがありますが。一方ISHだと、少し手順が煩雑なことと、RNAse freeな操作に慣れる必要があるところが面倒でしょうか。

　まぁ、一度やってみるのが一番わかりやすいのですが：P

お礼

大変わかりやすい説明をありがとうございます。
実験をするにあたって参考になりました。