western blotting のマスキングについて

質問

リン酸化タンパク質を認識する抗体を用いてwestern blottingを
行おうとしたところ、誤ってマスキング剤としてスキムミルクを
使ってしまいました。膜を浸した後でBSAのほうが適切だったと
気づいたのですが、スキムミルクによるマスキングは抗体はずし用
のバッファー（私のラボでは市販のリプロービングバッファーを使っています）で除去できるでしょうか？もしできるのであれば、反応
条件を教えていただきたいです。
通常、リプロービングの際はマスキングし直してから再度抗体反応
を行うのである程度は除去されているとは思うのですが、リン酸化
抗体で反応しない程度かどうかが知りたいです。

回答No.1

MIYD

難しいでしょう。
ただ、流しなおすサンプルを入手するのが不可能であれば、
試してみるだけの価値はあるでしょう。

お礼

回答ありがとうございます。
お礼が遅くなりすみません。
とりあえずやってみてから、と思いまして・・
結果ですが、やはり抗体で反応してしまい、
バックが非常に高くなってしまいました。
サンプルを調製するのは難しいのですが、
自分の不注意なので、やり直すことにします。