DNA

質問

アルカリ法によるプラスミドDNAの抽出のあとにDNAの濃度測定をおこないました、なんでDNA濃度をおこなったのかと、そのでてきたDNA濃度において、わかることはあるんですか？それぞれ、濃度の値がでてるんですが、何を示してるのかよくわからないので、おしてください

回答No.2

Sbacteria · ベストアンサー

質問の際は、何を測定したのか？何がわからないのか？をできるだけ多くの情報を盛り込んで、明確に質問するのが良いと思います。

理解ができているかどうかが？一番大事な事です。
それで、”陰性コントロール（ネガティブコントロール）”とは、何ですか？何のためにやっているか理解されてますか？　考えてみて下さい。

DNAに関しては、制限酵素（PstI)の基質として用いるために精製したわけですね。それなら、酵素反応にもちいる訳ですから、反応液中にどれだけ（ug あるいは pmol)DNAが存在するかわからなければ実験できない（完全に消化しているかどうか判断できない、あるいは少なければ、染色しても見えない）からです。そのために濃度を測定しているのです。

補足

最後に電液泳動するんでうが、そのさい撮影した、電気泳動の撮影をして、白いのがでてきてるんですが、これは、なにをしめしてるのかがわかりません、、、

回答No.1

Sbacteria

質問の内容がつかめないので、回答になっているかどうかわかりませんが。
　どんなものでも、抽出した後に、その物質がどのくらいとれたか（yieldと言います）、どれくらい純粋か（purityと言います）を調べます。
　DNAの場合は、紫外部吸収スペクトルを測定するか、260nmと280nmの吸光度を測定するか、（他にもありますが．．）でしょうが、いずれにしてもDNAの構成単位で、比較的吸収が大きいプリン（アデニンとグアニン）由来の260nmの吸光度がDNAの量の指標になります。また、混入しているタンパク質は280nm近傍に吸収極大を持つので、OD260/OD280 の数値を（タンパク質が混入していないかどうかの）大体の目安に使用します。RNAの混入は、厳密には吸収だけではわかりません。

補足

ごめんなさい。。えっと、サンプル１では、制限酵素消化の院生コントロール、PSｔｌ無し、もう１つのサンプルは、Pstlで消化です、