吸光度を算出したいのですが。

質問

ある濃度のp-nitrophenyl palmitate(pNPP)を加水分解させて、最終的に加水分解されたp-nitrophenolがどれくらいの吸光度を示すかを算出したいです（計測する際、実験の都合上15倍希釈をしています）

自分なりに計算しますと
pNPP濃度=2.0×10^-4(mol/l)
pNPPのモル吸光係数＝15.09×10^6(cm^2/mol)
よりLambert-Beerの法則より
15.09×10^6×１×2×10^-7÷15(希釈したため)≒0.2

となりました。
ただ、加水分解されてできるのはp-nitrophenolなのだから、そのモル吸光係数を用いて計算するのが正しいと思うのです。
でも、p-nitrophenolのモル吸光係数は

http://catalog.castle104.com/p/83939-new-england-biolabs-p-nitrophenyl-phosphate-pnpp-

を参照する限り、1.8×１０＾４M-1 cm-1らしいです。
これで計算すると、単位の次元は合わないし、無理やり計算すると恐ろしく低い吸光度が算出されます。
どちらが正しいのでしょうか？
後者の場合、自分は何を間違えているのでしょうか？

どなたかご教授お願いします。

回答No.2

tir70 · ベストアンサー

単位を整理しましょう．濃度単位Mは，mol/Lです．一方，

>pNPPのモル吸光係数＝15.09×10^6(cm^2/mol)

では，濃度単位としてmol/cm^3を使っています．さらに，

>1.8×１０＾４M-1 cm-1らしいです。

の方は，濃度はM単位ですよね．Mとmol/cm^3で，1000倍の違いがあります．したがって，0.2 mMのpNPPが100％反応してp-nitrophenolが生成すると仮定して計算すれば，

>低すぎる数値が算出されてしまいます。

とはならないと思います．ここまで理解してもらえたら，この件は落着すると思いますが．

回答No.1

tir70

モル吸光係数の単位，M^-1 cm^-1の"cm^-1"は，セルの中の光が通る長さ「光路長」に関係した単位です．即ち，光が試料の中を単位cm通過する時の吸光度．通常，分光光度計による測定では，光路長1cmのキュベットを使うことが非常に多いので，光路長を意識する機会があまりないのは確かですが．

補足

返信ありがとうございます。
すごい基本的な事を教えてください。
この大文字のMはmol/Lを示しているんですかね？
なら単位の次元があって、納得できます。

でも、そうなるとこの反応系においてp-nitrophenolの吸光係数を用いるのは間違いということになるんでしょうか？
低すぎる数値が算出されてしまいます。