mutagenesisキットについて。

質問

mutagenesisキットについて。
mutagenesisの原理についてです。プライマーで増幅させた環状ＤＮＡはnick(切れ目)が付いたままですが、大腸菌に入れるとnickがくっつくそうですが、なぜでしょうか。宜しくお願いします。

回答No.1

larme001

大腸菌の持っているDNA修復系によって一本鎖切断nickなら修復されてスーパーコイルになると考えられています。

平滑末端ライゲーションでもベクターのセルフを防ぐためにフォスファターゼ処理してサブクローニングしますが、その時もnickは出来ているはずです。