リグニンの染色

質問

植物根に含まれているリグニンの様子を、染色法で調べたいと思っています。
本で調べたところ、フロログルシノール・塩酸法が一般的とのことでした。
その本では「切片に、18％の塩酸に溶かしたクロログルシノール(飽和)を加えてカバーグラスを置き、顕微鏡で観察する」とありました。

この文章だけだと
(1)反応の原理
(2)切片を浸しておく時間
(3)塩酸に飽和するフロログルシノールの量
などがわかりませんでした。

この反応のことをご存知の方がいたら、アドバイスお願いします。

回答No.1

geneticist12

その手法そのものは知りませんが、一般論で、

実験で飽和溶液とあれば、溶媒に溶質を溶け残りが出るまで加えて上澄みを使います。
フロログルシノールはベンゼン環にOH基が３つ付いたものらしいので、フェノールに似て、水を含むと液体化するのかもしれません。この場合、飽和溶液とは、水相（フロログルシノール飽和塩酸溶液）と有機溶媒相（塩酸飽和フロログルシノール）の二層に分離したうちの水相を使えば良いと思います。水相が上層に来ると思います。水に溶けにくそうですから、わずかな量で飽和にいたると思います。

＞切片を浸しておく時間
試薬をたらしてカバーグラスを置くとあるのであれば、反応させながら時々検鏡して、ちょうど良い染まり具合のところで観察すれば良いのでは。

お礼

回答ありがとうございました。

わかりやすい文章で書いてくださったので、理解しやすかったです。
ありがとうございました。