計算ができないです

質問

理系の癖に計算が苦手で頭が混乱しています。
申し訳ありませんがこんな私に計算の仕方を分かりやすくご教授ください。

20nmolのPrimerがあります。
これを200μｌのTEに溶かしました。（質問(1)；この濃度は2mmolですか？）

この希釈したPrimerを、Total 25μｌの反応液に、30pmolの濃度になるように入れます（質問(2)；希釈Primerはいくつ入れればいいのでしょう？）

自分で計算できるようになりたいのでサルでも分かる説明をお願いします！
よろしくお願いします！

回答No.2

lama6 · ベストアンサー

ANo.1です。
希釈して10pmol/uLとし、それを3uL加えてTotal25uLにするのであれば、
30pmol/25uL
となっています。即ち、
30pmol/25uL = 1200pmol/mL = 1200nmol/L = 1.2uM
です。
0.2～0.5uMであれば、少し多いですね。

細かい話ですが、
>これを更に10pmol/μｌに希釈（約1/１０希釈）にして、
>トータル２５μｌの反応液にボリューム的に３μｌくらい入れればいい
と曖昧表現するのはあまりよろしくないかと。。
最近の風潮なんでしょうか。。。

お礼

指示が早口でよく聞き取れず、やり方も曖昧になってました。しかしお蔭様でちゃんとPCRかかりました！ありがとうございます。

回答No.1

lama6

大学生・・・ですよね？

質問(1)；この濃度は2mmolですか？
違います。
まずご質問中の表記自体が濃度ではありません。。。
20nmol/200uL = 0.1nmol/uL = 100pmol/uL = 100nmol/mL = 100umol/L
です。

質問(2)；希釈Primerはいくつ入れればいいのでしょう？
30pmolの濃度になるという表現がまずおかしいです。
仮に30pmol分のプライマーを加えるという意味であれば、
プライマーの濃度は現状
100pmol/uL
ですので、自ずと答えは分かるかと。。。

お礼

回答ありがとうございます。
希釈したものは100pmol/μｌになったんですね。
これを更に10pmol/μｌに希釈（約1/１０希釈）にして、トータル２５μｌの反応液にボリューム的に３μｌくらい入れればいいのでしょうか？（PCRは大体プライマー終濃度０．２～０．５μMにするので）
もしくは30pmol/μlにして1μｌ加える・・・・