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プラスミドの精製
プラスミドを精製し、EcoRIで処理しました。これをアガロース電気泳動したところ、+極側に色素入りのバンドが見えました。これはプラスミド以外の分子なのか、何らかの試薬の残留物なのでしょうか? ちなみに使用した試薬は、Soln.1(glucose,Tris-HCL,EDTA)、Soln2(NaOH,SDS)、Soln3(CH3COOK,CH3COOH)、イソプロピルアルコール、エタノール、TEバッファー、TAEバッファー、RNase溶液、アガロースゲル染色液です。
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- Penfield
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回答No.3
uv下でも見えるバンドなら、RNAが完全に消化されていないのでは?
- TCA
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回答No.2
#1の方も書かれていますが、可視光の下で見えるバンドでしたら、ローディングバッファーにどのような色素が入っているか調べてみてはいかがでしょう。 市販されているローディングバッファーでよく見かけるのはキシレンシアノール(XC)、ブロモフェノールブルー(BPB)、オレンジG(OG)です。電気泳動すると、XCは約4kb、BPBは約300bp、OGは約50bpの移動度を示します。
- methyl
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回答No.1
「色素入りのバンド」というのが何を指すのかはっきりわかりませんが、UVを当てなくても見えるバンドということなのでしょうか?それは、泳動前にサンプルと混ぜたローディングバッファーに含まれるBPB(ブロモフェノルブルー;濃青)かXC(キシレンシアノール:水色)ではありませんか??
補足
UVを当てなくても見えました。