TCA Precipitation
TCA precipitation
Protein
↓
↓ ←add 2％Doc 1/100 volume (全体量に対して1/100の量のDoc)
↓
Place on ice for 15min
↓
↓ ←add 100％TCA 1/10 volume
↓
Place on ice for 1hour
↓
c,f, 14000rpm for 10min at 4℃
↓
↓→→→→→→→→→→→→↓
ppt sup (溶液はとっておく)tube number (1)・(3)
↑→→↓
↑ ↓ ←add cold acetone 100μl
↑ ↓
↑ voltex for 1min
↑ ↓
↑ c,f, 14000rpm for 10min at 4℃
↑ ↓
↑ ↓→→→→→→→→→→→→↓
↑ ppt sup (溶液はとっておく) tube number (2)・(4)
↑ ↓
↑←←↓
↓
Dry up 95℃ 1~5min heat block (アセトンを蒸発させるため)
↓
Add the 5×Loading Buffer / PBS(-)
PBS(-) 20μl
5×loading buffer 5μl
25μl
って感じでTCA Precipitation（タンパク濃縮）の練習(技術習得)をしているのですが・・・実験を始めて２ヶ月で、まだ大学２年なのでネットでの検索法もイイサイトもわからず、有用性をわからないまま実験をしています。
どのような時にTCA Precipitationを用いるのかとか基本的なことから教えていただけるとありがたいです。
僕が今やっていることはロトフォアが中心なので・・・ロトフォアに詳しい方はロトフォアについても教えてください。
