細菌の密度

質問

ある論文で「Bacteria were harvested at the exponential growth phase and inoculated at a same starting density of 10の５乗 ml(－１乗） in a medium」
って書いてあったんですけど、この密度の細菌はどのようにして用意するんでしょうか？

回答No.1

jinia2012 · ベストアンサー

英文が理解できていませんので
「一定の濃度の細菌を得る方法」ということで解答します。

私が仕事で使用している細菌は
一白金耳掻きとって液体培地(9mL)に接種し
24時間培養すると10の9乗CFU/mLになることが分かっています。
別の酵母は10の7乗CFU/mLです。

菌種や培地、掻きとる量や培養温度によっても異なります。

増殖期を過ぎると死滅しますので
一般的な細菌の場合、液体培地で前培養するのは1日と考えています。

ここから段階希釈して，欲しい濃度の菌を得ることができます。

また、前培養は行わず、新鮮な培養菌を掻き取り
段階希釈して欲しい濃度を得ることもできます。
ベテランは，100CFU前後の菌液を感覚的に調製することも可能です。

英文を理解していないため、回答が的外れであればすみません。

補足

回答は完全に僕が求めているものです。
ただ、感覚的にも分かっていない場合は他にどんな方法がありますか？
うちには、660 nmのOD値を測れる吸光光度計があるので、それを使って何か方法が考えられないでしょうか?

回答No.2

jinia2012

一般的な細菌試験をされたご経験はありますか？
まず予備試験を行います。
一白金耳取り、24H前培養したものを段階希釈し、
生菌数を測定します（平板混釈法または平板塗抹法）
生菌数は300CFU以下の平板を信頼ある数値として採用します。

これで原液濃度が分かります。

前培養のかわりに一白金耳掻き取って希釈する方法でも
菌数の測定方法は同じです。

掻き取る菌の量は
例えば同じ白金耳を使って
ループに平らに一回分とか、自分ルールで正確に取ります。
原液の濁り具合も「うっすら白濁」など覚えておきます（参考に）

予備試験で菌数をカウントし、原液濃度が分かれば
実際の試験で同様に培養し、希釈して使用することができます。

同時に、使用した菌液の段階希釈を行い、
接種菌数に間違いがなかったことも確認する必要があります。

何回か練習すると、菌数に誤差はあれど
オーダーまでは変わらない範囲で調製できると思います。

菌のオーダーが分からない場合は
推定で2段階とか3段階を、念のため測定するやり方もあります。