細胞のトランスフェクションについて

質問

こんにちは

今度、細胞をトランスフェクションした後に
ウエスタンブロットをすることになりました。

このトランスフェクションとは簡単にいうと
細胞に遺伝子を移入させるという事ぐらいで
なんのためにこの作業を行うのか分かりません。

また、トランスフェクションを行ったあとに
ウエスタンブロットで蛋白の発現を確認する事で
なにが分かるのでしょうか？

実験の流れがいまいち掴めず困ってます。
詳しい方、簡単に流れだけでも教えてください。
どうぞよろしくお願いします。

回答No.1

babanbabanbanban · ベストアンサー

次のようなことが分かります。

１．その遺伝子はその動物で本当にタンパクとして発現するのか。
２．きちんとトランスフェクトした遺伝子が細胞に発現したか。

そして次のようなことに使います。

１．その発現タンパクを精製して抗体を作る→生体での発現を調べられる（免疫染色、組織サンプルでのウエスタン、症例と健常で血中濃度を比較したりなど）

２．その細胞で実験をする。（ケモカインレセプターなら遊走機能を持つか、カルシウムチャネルならカルシウムが↑するか）

３．発現遺伝子の機能を探索する（機能が未知の遺伝子なら、上の２の実験をしたり、細胞の観察をしたりして機能を予測します。）

論文をコツコツと読んでいるうちに具体例がわかるでしょう。

お礼

早々の回答、本当にありがとうございます。
ちょっと流れがつかめました。
ある程度流れがわかっていると、論文の理解力が
高まるし、どこの角度から勉強した方がいいか分かりますよね。
回答をもらう前は、何から調べて良かったのかさえも
分かりませんでした。
もっと分かってきたら、また違う角度で疑問が出てくると思います。
その時はまたよろしくお願いします。
本当にありがとうございました。