培養細胞へのアデノウイルスベクター導入

質問

カチオニックリポソームですと、だいたい８０～９０％コンフルエント時にtransfectionしますよね。
adenovirusを使用する場合、細胞の濃度は発現効率に差が出てきますでしょうか。
やはり、ある程度コンフルエントになってから導入すべきなのでしょうか。
ちなみに、目的はあるがん抑制遺伝子を導入し、その後培地中のVEGF濃度を測定するというものです。

回答No.1

f8f9 · ベストアンサー

リポソーム法によるtransfectionは細胞が死にやすいこともあって、細胞密度が高い方が効率がいいことがあります。
ウイルスを感染させる場合は、ウイルスのtiter(力価）が重要です。titerが低ければ細胞密度が高いと、感染した細胞の割合は全体の細胞から見て低くなります。titerが低い場合はポリブレンという化合物を感染時、一緒に加えると１桁くらいあがります。

感染の効率を上げたいのなら、細胞は少ない方がいいと思います。

お礼

ご回答いただき、ありがとうございました。
まく細胞を少なくしてみます。
一応、１２ウェルに１E+05まく予定です。