ＳＤＳ－ＰＡＧＥのサンプルバッファーの濃度について

質問

いつもは２×のサンプルバッファーを使用しているのですが、６×のサンプルバッファーを使用したいのですが、組成が分かりません。
どのように作ったらいいのでしょうか？

回答No.1

geneticist12

２ｘの組成は

0.1 M Tris-HCl (pH 6.8)
2% SDS
20 % glycerol
0.2 % BPB
0.2 M DTT (20%≒3 M 2-mercaptoetanolの処方もあり）

です。
私の作り方は、

1 M Tris-HClのストック溶液を1 mL
glycerolを2 mL
SDS、BPBは粉末で加えて、蒸留水で8 mLにしたものをストック溶液として、使用直前に必要量に1 M DTTストック溶液を1/4 volume加えます（つまり10 mL中2 mL）。

Glycerol, 1 M 1 Tris-HClのストック溶液,1 M DTTストック溶液（またはmercaptoethnol）を使う限り、4xが限度です（それ以上はvolumeオーバーしてしまいます）。

濃いストック溶液、あるいはDTTなら粉末を使い、glycerolの代わりに粉末のsucroseを使えば、あるいは6x も可能かもしれませんが、4x以上は見たことないですね。