HPLCでの検量線作成について

質問

はじめまして。HPLCを使用していて検量線を作成するのですが、検量線作成のためのサンプル濃度が分からなくて困っています。
次にサンプル調製についての内容になります。
・薬物Xを０．００２５ｇはかり１０ｍLのメタノールで溶解させる
（この溶解液を原液としマイクロチューブの並び順を示すときには★で示す）
・純粋なメタノールを４００μL、９００μL、９００μL、１００μL、１００μL、１００μLずつ空のマイクロチューブに入れていく
（マイクロチューブを４００μLは(1)、９００μLは(2)と(3)、１００μLは(4)と(5)と(6)というようにマイクロチューブの並び順を示すときにこのようにします）
・マイクロチューブの並び順は次のようになります
★ (1)　(2)　(3)
　 (4)　(5)　(6)
・原液入りマイクロチューブ（★）から１００μL採って(1)に入れる
・(1)からそれぞれ１００μLずつ採って(2)と(4)に入れる
・(2)からそれぞれ１００μLずつ採って(3)と(5)に入れる
・(3)から１００μL採って(6)に入れる
このマイクロチューブ(1)~(6)に入っている薬物Xの濃度の計算方法が分かりません。
どなたか分かる人がいましたら至急教えて下さい。
よろしくお願い致します。

回答No.2

c80s3xxx

>・薬物Xを０．００２５ｇはかり１０ｍLのメタノールで溶解させる

この時点での濃度は求められるんですかね？

> ・原液入りマイクロチューブ（★）から１００μL採って(1)に入れる

(1)には400μLのメタノールがあり，そこに★の原液から100μL入れるのだから，全量は近似的には500μLとなり，濃度は★より5倍に薄まると(濃度の数値は1/5になる)．

> ・(1)からそれぞれ１００μLずつ採って(2)と(4)に入れる

(2)には900μLのメタノールが入っているのだから，同様に(1)のそのまた10倍に薄まった溶液になる(濃度は(1)の1/10になる)．
(4)は100μLのメタノールが入っているのだから，(1)が2倍薄まったということ(濃度は(1)の1/2)．

他も同様に計算すればいいのですが，そもそもこういう計算ができないうちは，HPLCの実験などすべきではありません．
これはしようとしているあなたより，させようとしている指導者なり上司なりの問題です．
あなたはこんなところで質問しないで，指導者なり上司なりから，適切な説明を，あなたが理解できるまで受ける必要があります．
こういう説明をちゃんとできない指導者なり上司ならば，そもそも指導者なり上司なりを務める資格もありません．

回答No.1

kgu-2

わざわざ難しくする意図が理解不能。なぜ、簡単にしないのか不思議。
HPLCを使っている人に訊くべし。