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検量線標準溶液の濃度
フェナントロリン染色を行う際、 過去に標準溶液の濃度を下記の通りで、検量線を作成していたみたいです。 0 mg/l, 0.5 mg/l, 1.0 mg/l, 2.0 mg/l, 4.0 mg/l, 6.0 mg/l 濃度の小さいときは0.5 間隔なのに、 大きくなると間隔を大きくするのはなぜですか?
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>0 mg/l, 0.5 mg/l, 1.0 mg/l, 2.0 mg/l, 4.0 mg/l, 6.0 mg/l 実験の操作には、必ず意味があります。「6.0mg/lは何故」と質問すれば、返答に困るハズです。 >大きくなると間隔を大きくするのはなぜですか? 善意に解釈すれば(それも最大限で) 1.0までのサンプルであることが想定できた。 実際に検量線を描くと、間隔に規則性(=合理性)は見られませんので 1 合理性を考慮せずに、経験的に作成した 2 あやまった標準液濃度が、そのまま伝えられた(特に6.0は8.0でないかと) ちなみに、最後の6.0が8.0なら、倍々という規則性はあります。しかし、吸光度は、濃度に単純に比例するので、倍々の標準液を作るのは、間違いです。すなわち、0.5~1.0に比して、高濃度域では不正確になるから。 お利口な人には、別の理論があるのかも分りませんが、 検量線の要点は、 1) 一番高い濃度をどのように設定するか。 2) 間隔をどうとるか、です。 ちなみに、「各濃度で2回、あるいは3回測定して、平均値をとり、その値で検量線を描く」なんぞの馬鹿丁寧な実習もあるとか。「練習(=学生実習)」の返答なら納得しますが、研究室でするのは文字どおり馬鹿丁寧です。 実験の操作には、必然性がありますので、それを理解・確認しながら行ってください。私の実習書には、そのページの右半分に操作の理由が一つ一つ書いてあります。 学生は「次どれ入れるん?」と訊き、友人は「このビン」と言いながら渡しますので、試薬を加えるのではなく、右からビンから左の試験管などに移動させているだけですが。
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- DEFS-7
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検量線はリニアで重さ付けなしで作成しますか? その場合、どうしても高濃度側に引っ張られやすいので、低濃度側の点を多くして、定量に必要な濃度範囲で、より正確な直線を得ようとしているのではないでしょうか。 一方で、ダイナミックレンジは、精度上必要なので(狭いくらいですが)、高い濃度も取って、直線性を保証しているのでは?
お礼
高濃度にひっぱられるのですか? なるほど、そういう考えの下、検量線を作成しているのかもしれません。 回答ありがとうございます。
お礼
回答ありがとございます。 「6.0mg/lは何故」と質問してみようと思います。 経験上何かあるのかもしれません。