ベストアンサー 形質転換について 2008/08/02 16:55 形質転換の概要を、 宿主ベクター系の役割も含めて 教えてください。 よろしくお願いします。 みんなの回答 （1） 専門家の回答 質問者が選んだベストアンサー ベストアンサー MIYD ベストアンサー率44% (405/905) 2008/08/03 09:55 回答No.1 教科書を読んだほうが早いのでは？ 何らかの形質を持たない大腸菌に、 何らかの形質の変化を起こすベクターを導入する。 その形質を持つ大腸菌を単離することにより、 ベクターが導入された大腸菌を得る。 通報する ありがとう 0 カテゴリ 学問・教育自然科学科学 関連するQ&A 形質転換、形質移入、形質導入について 形質転換、形質移入、形質導入、という言葉の違いが分からなくなりました。形質導入はtransductionでファージを介しして菌にDNAを導入することで、形質移入はtransfectionで細胞にエレクトロポレーション法などで工学的に導入することで、形質転換はDNAが導入されて形質が変わる事を指すので、細胞、菌、両者とも形質転換した、と言えるのですよね？形質転換、形質導入の違いは、DNAを導入する際のベクターがプラスミドかファージの違い、とある本もあってますますこんがらがりました。ベクターの違いなのか、導入される物（菌か細胞（cos7など）で分けてるのか、また現象をさしているのか操作をさしているのか曖昧です。どなたか教えて下さい。 ベクターとプラスミドと形質転換 ベクターとプラスミドって何が違うんですか？ 意味的にはほとんど同じだと思うんですが。 形質転換で大腸菌に入れて増やしますが形質転換の時に導入した物と同じものが得られるんですよね？ 形質転換によってプラスミドはどれくらい増えるものなのですか？ 形質転換について 学校で大腸菌を使った形質転換の実習をしたのですが、形質転換の身近な例って何かありますか？ 納豆の菌とかと聞いたのですが具体的にどういう風に形質転換なのかわかりません。 納豆菌以外でもなにか例があれば教えてください。 形質転換 形質転換の原理って何になると思いますか？ PCR反応における、形質転換について PCR反応における、形質転換効率と、組換えDNA作成による形質転換効率の度合いについての質問です。 今回の実験では、PCR反応をしていく上で、ベクターにDNA断片を挿入すると、ベクター上のβーガラクトシダーゼ遺伝子が破壊されるため、本来なら、この遺伝子の働きによってX-galという成分が破壊されてできるはずの青色の色素が合成されずに白色になる…とあるのですが、コロニーの色素がほぼ白色になっていました。 中にはコロニーの中心点にわずかながらですが青色がところどころのコロニーに点在し、どのような反応が起こったことでこのような反応になったのかがわかりません。 あるサイトでは以下のように記載されていたのですが、なんとなく理解できないので、詳しく解説してもらえたら助かります。 よろしくお願いします。 全部白（すべてに外来DNAが挿入され、形質転換もされている） ↑これは納得できます。 白と青（挿入されないものもあるがほとんどに外来DNAが挿入され、形質転換もされている） ↑形質転換されるときにベクターの反応が何らかの理由により形質転換されておきるものだと思います。 全部青（外来DNAは挿入されなかったが形質転換はされている） ↑これが一番のなぞです。うちの実験の解説では、X-gal（元は無色）をβーガラクトシダーゼが酵素活性することで加水分解しコロニーが青色に沈着するはずですが、いったいどういうことなのでしょうか？ そもそも、この実験では、ベクターを挿入することで白色のコロニー（組換え体）を生成することに焦点を置いているはずで、青色のコロニーを生成することに焦点を置いていません。ですから、外来DNAが挿入されていないから白色コロニーを生成できなかった、だから形質転換できていないはずなのではないでしょうか？ 大腸菌の形質転換について質問です。 大腸菌の形質転換について質問です。 X-GalとIPTGと形質転換した大腸菌をまいたところ、青コロニーが全く出ませんでした。 この原因は何が考えられるのでしょうか？ 自分の中で一つ気になるのは、PUC19ベクターを使ったのですが、ベクターを調整した後電気泳動でベクターを確認したところかなり薄かったことです。 もし、ライゲーションした時にベクターが全く入っていなかった状態だと、コロニーはどのようなものが現れるのでしょうか？ 何かわからないことがあれば、補足させていただきますので、質問の回答よろしくお願いします。 一過性の形質転換とは？ 形質転換には、2種類存在し、一過性のものと安定な形質転換があるみたいですが、よく違いがわかりません。 なぜこのような違いが生じ、どのように使い分けたりしたらいいのかわかる方いましたら教えてもらえませんか？ ルーチンの形質転換 昆虫細胞でのタンパク質の発現のところで、「ルーチンの形質転換」という言葉が出てくるのですが、どのようなものなのか教えていただけないでしょうか。 普通の形質転換とどう違うのかなども知りたいです。 宜しくお願いします。 形質転換について アグロを用いて植物の形質転換を行おうと思っています。植物体に存在する遺伝子を導入し過剰発現、もしくはアンチセンスにより発現抑制を行って、その遺伝子の機能を見ることを目的としています。そこで疑問があります。アグロより植物体に導入遺伝子が挿入されるということですが、実際植物体のゲノムのどの位置に挿入されるかはランダムなのでしょうか？ランダムだと導入遺伝子以外の遺伝子を分断させてしまったり、コドンがずれたりしてしまって、形質転換後の植物体の変化が目的遺伝子によるものだといえなく形質転換の意味があまりなくなってしまう気がしますがどうなのでしょうか？ 形質転換について 乳酸菌から抽出した５ＫｂのプラスミドとpUC19ベクターをXba1で消化後、ライゲーションしてE.coli5αにエレクトロポレーションしてIPTG,X-Gal含有LBプレート上で白色のコロニーが出現しました。そのコロニーを培養してプラスミドの抽出を行い、Xba１で消化すると２本のバンドが確認されたのですが、再び培養後に抽出を行い、電気泳動を行うとpUC19のバンドしか確認されませんでした。これはどういうことなのでしょうか？組み込まれたインサート部分が形質転換後にベクターから脱落することってあるんでしょうか？ 形質転換効率について 普通のｐBベクターをコンピテントセルに取り込ませ、L-Ampプレート上に植菌したもの（A)と、XhoIで処理した16ｓｒRNA（PCR増幅分）を挿入した組み換えｐBベクターをコンピテントセルに取り込ませ、L-Amp・IPTG・X-galプレート上に植菌しました。 形質転換効率が低下する理由はなんなんでしょうか？ クロロプラストの形質転換 クロロプラストの形質転換でいくつか質問があります。 細胞中にクロロプラストはたくさんありますが、遺伝子導入でクロロプラスト上の形質を変える場合には、そのうちの一つでも変わればよい（ヘテロプラズミー？）のでしょうか。それとも、すべてを置換（ホモプラズミー？）させないといけないのでしょうか。 またヘテロプラズミーかホモプラズミーかはどのようにみわけるのでしょうか。 形質転換でクロロプラスとが一つでも変わればいいとした場合、その遺伝はどうなるのでしょうか。 実際に、クロロプラストの形質転換をする場合、プロモータは35Sでよいのでしょうか。 文献の中に、homologous recombinationという表現がありましたが、これが日本語訳で適当な訳があるのかと、どのような事象なのか知っている方がいましたら、併せてお願いします。 形質転換に関して 文献を読んでいて疑問に感じたので質問しました。 ある植物体の実生根を切除し、形質転換体を作出することを目的としてAgrobacterium rhizogenesを感染させたところ毛状根が出現しました。 この毛状根をカルス化させ、完全な植物体を得たという文献なのですが、参考文献にさかのぼると、この毛状根はキメラ化してしまっていたようです。 キメラ化した組織をカルス化させ、そこから再分化させて作出した個体は、キメラ化していない完全な形質転換体となりうるのでしょうか？ 形質転換導入ベクターの大きさの限界？ コンピテントセルDH5αを使って形質転換を行っているのですが、おそらく導入ベクターが大きすぎるせいで、上手くトランスフォーメーションが成功しません。 PcoldTFベクター(約4500ｋDa(?))に目的遺伝子(約1000ｋDa(?))を組み込んだ導入ベクターなのですが、コンピテントセルにはどれくらいの大きさのベクターまで導入できるのでしょうか？ また、大きいベクターでも導入可能な方法などあれば教えて頂けないでしょうか。 拙い文章で申し訳ありませんが、ご教授お願いいたします。 形質転換効率？の求め方 プラスミドの導入による細菌の形質転換のレポート作成中です。 形質転換効率（cfu/μg）求める式、どなたか教えていただけませんでしょうか？？ また、プラスミドによる薬剤耐性化が問題となっている細菌感染症の例には、どのようなものがありますか？？レポの提出日、明日なので、誰か助けてください＞＜よろしくおねがいしますｍｍ 大腸菌の形質転換の実験について 大学生です。 現在、大腸菌に形質転換を行い、その組み替えたDNAの種類を見分ける実験をしています。プラスミドDNAには、アンピシリン耐性の遺伝子と、ラクトースオペロンＺの遺伝子が組み込まれています。 そこで、気になった事について質問したいです。 まず、形質転換した大腸菌を培養したのですが、そのコロニーについて ○どうしてコロニーは丸形なのでしょうか？ ○たまにひょうたん形をしたコロニーがいますが、なぜでしょうか？ ○また、そのコロニーを楊枝でつつき、LB培地で培養したのですが、 つついた楊枝にはどれ位の大腸菌がついているのでしょうか？ ○大腸菌を旋回培養する際、目(目はないが)がまわらないのでしょうか？ ○そもそも、LB培地の役割は何なのか ○組み替え率と形質転換率を調べるには、なんの数値を参考にしたらよいのか 質問が多くて申しわけありません。調べてもわからなかったので、よろしくお願いします。 大腸菌の形質転換 大腸菌の形質転換実験をしたんですが、そのとき大腸菌の形質転換効率は最適条件下で１×１０の７乗cfu/μｇ以上になると聞いたのですが、このときの実験の結果ではなりませんでした。学生実験だったのでやはり慣れている人がやるのとは違うのでしょうか？ 形質転換のときに使う抗生物質のことで 形質転換のときに使う抗生物質のことで教えてください。 まだまだ、初心者なので初歩的な質問になるのですが、形質転換のときに使う抗生物質を今まではアンピシリンを100 μg/mL入れていたのですが、今回からカルベニシリンを使用することになりました。 この時のカルベニシリンの濃度はアンピシリンのときと同じ100 μg/mLでいいのでしょうか。お願いいたします 形質転換 大腸菌の形質転換の学生実験（lacZ遺伝子に挿入して、X‐galを含んだ培地で培養）で白色コロニーからプラスミドDNAを回収したんですが挿入DNA が入っていませんでした。この理由を教えてください。 また（薄い）青コロニーからプラスミドを回収したらDNA断片が挿入されていました。この理由も教えてください。 形質転換後の大腸菌コロニー 形質転換後の大腸菌コロニーを大量培養したいのですが、振盪培養装置の量的制限もあり、必要なタンパク量まで培養バッチを重ねることにしました。種菌である大腸菌コロニーは培養のたびに形質転換をしなければならないのでしょうか。形質転換してから日数をおいての使用や継代は可能でしょうか。よろしくお願い致します。 注目のQ&A 「前置詞」が入った曲といえば？ 緊急性のない救急車の利用は罪になるの？ 助手席で寝ると怒る運転手 世界がＥV車に全部切り替えてしまうなら ハズキルーペのCMって…。 全て黒の5色ペンが、欲しいです 長距離だったりしても 老人ホームが自分の住所になるのか？ 彼氏と付き合って2日目で別れを告げられショックです 店長のチクチク言葉の対処法 カテゴリ 学問・教育 自然科学 理科（小学校・中学校）化学物理学科学生物学地学天文学・宇宙科学環境学・生態学その他（自然科学） カテゴリ一覧を見る あなたにピッタリな商品が見つかる！ OKWAVE セレクト コスメ化粧品 化粧水・クレンジングなど 健康食品・サプリ コンブチャなど バス用品 入浴剤・アミノ酸シャンプーなど スマホアプリ マッチングアプリなど ヘアケア 白髪染めヘアカラーなど
