ELISAのブランクの吸光度

質問

初歩的な質問となるのですが，
ELISA法で吸光度を測定し濃度を算出する際に
標準液及び検体の吸光度から，
ブランクの吸光度を差し引きますよね，
その時に，ブランクの吸光度が「-0.003」だったとすると
「+0.003」すると考えて良いのでしょうか？

回答No.3

noname#48316 · ベストアンサー

NO1です。

すいません。
質問の答えに答えていませんでした。
>この値の場合は，大きな誤差ではないと考えて
>差し引きはしなくていいのですね？
普通はめんどくさいので引かなくてもいいかもしれませんが、
実習などきちんとしたときは、引いた方がいいでしょう(笑)
たぶん。-0.003程度では何も変わりません。(笑)

とはいってみる物の、Excelで簡単に計算できますから、
やっぱり実際に実験した実測値ですから、ブランクを引いて、
計算した方がよいと思います。

補足

詳しく説明いただき，ありがとうございます．
とてもわかりやすかったです．

専門家の方ということで，あつかましく
もうひとつ質問したいのですが
ELISAのキットで測定する際に
スタンダードの値がめちゃくちゃにでてしまった場合
キットをもう一度買ってやり直すしか方法はないでしょうか？
何か他に考え付く方法がありましたら，ご教授願います．

回答No.4

Fiorina

＞ブランクの吸光度が「-0.003」だったとすると
「+0.003」すると考えて良いのでしょうか？

その通りです。全てのウェルの値から-0.003を引くことになるので、
数値には0.003を足すことになります。

お礼

回答いただきありがとうございます．

回答No.2

noname#48316

No.1です。
仮にブランクが-0.1なら、-0.1を引くことになります。
実際測った値が-0.1なのですから、偽造することは出来ません。

それと、
＞ブランクが0に近ければよい
とありますが、そんなことはありません。
別に、0.1だろうが、0.2だろうが、-0.5でも問題はありません。
それがブランクという物です。純水を測っているわけではありませんからね。
酵素orサンプル？を含まれない反応液を測っているわけですから。0の方がまれです。

もう一つ、-0.003を0と考えても良い。
としたのは、乱暴だったかも知れませんが、こう考える理由は機械の性能にあります。
吸光度を、プレートリーダーなどで測っている場合は、
結構誤差が多いです。測定系列も300μlとか、非常に量が小さいですよね。
誤差が多いので、そういいました。ELISAですから、プレートリーダーで測っているでしょう。
逆に、きちんとした吸光度計、セルを使用して測っているのなら、
誤差として許容できないかも知れません。

回答No.1

noname#48316

実測値が-0.003だったら、-0.003です。
ただ、人によっては吸光度は0以下にはならないというわけで0にしなさいというかも知れません。

そもそも、値が-0.003ですから、そんなの誤差で0でもいいでしょう。
本当なら、ブランクを多数作っておき平均値を用いたかったところです。

補足

回答ありがとうございます．
この値の場合は，大きな誤差ではないと考えて
差し引きはしなくていいのですね？

デュプリケイトで行った平均がマイナスだった場合なのですが・・・．
説明書によると「標準液及び検体の吸光度から，
ブランクの吸光度を差し引く」と書いてあるので
こういう場合は，どうするんだろうと思って質問しました．

ブランクは0に近ければ近いほど良いのでしょうが，
その値がもしも，-0.007になったら？，-0.014になったら？と，
プロではないので，どの程度を無視していいのかがわからなかったりします．