リポソームの製法(整置水和法，その他)
初めて質問させていただきます．
顕微鏡作りをしている者です．
現在，被測定物としてGUV(巨大リポソーム)を作成していますがうまくいきません．
いろいろ手を打っているのですが，
専門外なものですからこれでいいのか確信がもてない状況です．
また，論文には書かれていない，
基本的な事柄ができていない可能性もあります．
以下に私が試みてきたことを記述させていただきます．
ダメだしなどございましたら，
どうかご指摘をお願いいたします．
調製法としては，最も簡単に思えた静置水和法を用いています．(文献1,2)
(1)平底フラスコをよく洗い，
(2)リン脂質をヘキサンに溶解させ，
(3)埃が入らないように自然乾燥させてから，蒸留水で膨潤させ，
(4)5日間ほど冷蔵庫で静置しました．
すると，水中に濁りというか，膜状のものが浮遊しているのが見えました．
しかし，遠心分離機で沈殿させてもなにも得られず，
位相差顕微鏡でも何も見えませんでした．
ただし，論文中では
(3)では窒素気流中で乾燥，
(4)では窒素置換後静置
しているのですが，
設備上の限界から，空気中(ドラフター内)で行っています．
作業中の温度は全て10度以下で行っています．
ただ，PC(ホスファチジルコリン),PS(ホスファチジルセリン)は
ヘキサンになかなか溶けないので，
60度の超音波浴槽中で溶解させました．
ナス型フラスコとエバポレーターは一応あります．
[参考文献]
(1)Darszon A, Vandenberg CA, Schondeld M, Ellisman MH, Spitzer NC, Montal M,
Reassembly of protein-lipid complexes into large bilayer vesicles:Perspectives for membrane reconstitution.
Proc Natl Acad Sci USA (1980) 77, 239-243
(2)寺田博,吉村哲郎,
ライフサイエンスにおけるリポソーム実験マニュアル
シュプリンガー・フェアラーク東京刊
お礼
分かりやすいご説明ありがとうございます。