遺伝子のノックアウト

質問

植物で、新たな遺伝子を導入することなく、目的の遺伝子を破壊し、スクリーニングする方法ってありますか？

回答No.4

Chicago243 · ベストアンサー

可能かどうか分かりませんが、リコンビナーゼとつぶしたい遺伝子のテンプレートを使って、あとはクローンが取れるなら、各クローンをひとつずつ見ていくのがいいかもしれません。リコンビナーゼと遺伝子のテンプレートはマイクロインジェクションとかで確実にいれると、導入効率のとことでつまずかないと思いますが、ホモロガスリコンビネーションの確立が分かりませんので、系が成り立つかはターゲットの生物によって違うようなきがします。

お礼

植物では、相同組み換えは確立されてませんよね。やはり系が成り立ちませんか。ありがとうございました。

回答No.3

Chicago243

>植物の品種改良のようなことを想像しています
形質によりませんか?
寒冷地で育つという類のものであれば低い温度で飼育してとかでスクリーニングできるでしょうし,,,
目的は遺伝子を得ることではないですよね。
ですから、目的の形質をスクリーニングできる(そういう遺伝子の変異株が優先的に生えてくる)環境をつくり得るならYesです。ただし、スクリーニングで目的の品種が生えてくるかは保障の限りではありません。

補足

すいません、環境ではスクリーニングできないものをつぶしたいのです。

回答No.2

walkinoctopus

"遺伝子組み換えという汚名"というのもちょっとわからないのですが、”組み替え”でさえなければ”遺伝子操作”する分にはいいんのでしょうか？RNAiだともちろんノックダウンになりますが、条件を検討すればとりあえず90%以上には導入できると思いますよ。あるいは一細胞をピックアップして遺伝子の発現量を解析するとか。あまり現実的ではないですけどね。

補足

植物の品種改良のようなことを想像しています。だから一細胞云々でなくそうした形質を持つ植物種を作るという観点です。RNAiの場合はどういった方法なんでしょうか？アグロでRNAiを起こすような配列と薬害耐性遺伝子を同時に導入し、薬害耐性でスクリーニングといった方法だと思うのですが、薬害耐性やスクリーニングなしにできるのでしょうか？

回答No.1

walkinoctopus

"新たな遺伝子を導入することなく"という言葉の意味がいまいち理解できないのですが、ノックインによるノックアウト以外という意味でしょうか？
やはりメジャーなのはRNAiになると思いますが。

補足

遺伝子組み換えという汚名を被ることなく、という意味です。ノックインするのはいいのですが、そこに薬害耐性遺伝子やGFPを導入させたくないということです。RNAiを起こす配列を入れるのはいいのですが、それをスクリーニングする方法ってあるんでしょうか？