細胞小器官に含まれるタンパク質の活性の調べ方

質問

現在密度勾配遠心により細胞小器官を分画しています。(使用しているのは神経細胞)
一応スクロースなどを使い細胞小器官に含まれるタンパク質の活性がなくならないようにして分画しているのですが、その活性を調べた方がいいと思い質問させていただきました。
どのような方法がお勧めでしょうか？ちなみに分画はミエリンの比較的多い分画、シナプス小胞の比較的多い分画、ミトコンドリアの比較的多い分画があります。(シナプス小胞の比較的多い分画、ミトコンドリアの比較的多い分画が特に重要です。)
どれか一つでも参考になるような方法があれば教えてください。よろしくお願いします。

回答No.1

MIYD

何のタンパク質でどのような酵素活性を持つのか書かれていないようですが、
それではアッセイ法について解答の仕様がないと思います。

参考になる方法としては
各サンプルの溶液の組成をそろえて、
調べたい酵素の酵素活性により呈色する基質をいれて
一定時間反応後に反応をとめて
吸光光度計で測ってみてはいかがでしょうか。

発光する基質でもできると思いますし、
反応後に、未反応の基質、または反応産物を別の酵素や試薬で定量することもできると思います。

お礼

問 お礼が遅くなりました。すいません。
回答ありがとうございました。参考にさせていただきます。

補足

お礼が遅くなりました。すいません。
回答ありがとうございました。参考にさせていただきます。