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検査項目と抗凝固剤

2004/10/07 22:39

EDTAとクエン酸ナトリウムはどちらとも脱カルシウム作用があると書かれていますが、クエン酸ナトリウムは主に凝固検査に使われ、一方EDTAは凝固系に使ってはいけないといわれました。同じ作用の抗凝固剤なのに、なぜ使い分ける必要があるのか教えてください。お願いします。

saboten10
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医療
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noname#8027

2004/10/07 23:14 回答No.1

日本臨床検査医会のホームページ内にQ&Aがあるのですが、そこからの抜粋です。（Q）凝固検査の抗凝固剤としてクエン酸ナトリウムが用いられるのはなぜでしょうか。またEDTA塩を用いないのはなぜでしょうか。（長野県　臨床検査技師）（A）凝固検査における抗凝固剤の目的は、血漿中のカルシウムイオンの濃度を低下させ、検査実施まで凝固反応が起こらないようにすることにあります。測定開始時には改めて必要なカルシウムイオンを添加することになります。カルシウム塩を形成する中性塩のクエン酸塩やシュウ酸塩は、このような測定系に適しています。以前はシュウ酸塩が用いられていましたが、クエン酸ナトリウムと比較して、時間とともに第V因子や第VIII因子の活性の低下を起こしやすく、またPTも長めになる傾向があります。一方液状で使いやすいクエン酸ナトリウムは、1953年トロンボプラスチン形成試験の際に使用されたのが世界で最初です。この時は、血液と等張の3.8%のクエン酸ナトリウム（5水塩)が用いられ、やがて国際標準化委員会の働きかけで109mM、3.2%クエン酸塩ナトリウム（2水塩）へと標準化されました。　血球算定の検査の際に通常用いられるEDTA（ethylene diaminetetraacetic acid）の場合は、最も代表的なキレート化剤で、カルシウムイオンを中心に最も安定した5員環を有する錯体を形成します。さらにEDTAはその他の多くの金属とも安定した錯体を形成するため、カルシウムを含む金属イオンの定量分析に用いられています（EDTA滴定）。　ところで、EDTA滴定において金属が水酸化物として沈殿するのを防ぐために用いる補助錯化剤として、鉄とのキレート作用を持つクエン酸塩が用いられます。したがってクエン酸塩の抗凝固活性には、このキレート作用がかかわっている可能性もあると思います。　実際に血球数算定に用いられている1.8mg/ml EDTAを、凝固学的検査の際に使用すると、APTT、PTともに、クエン酸よりも少し長めの結果となります。また凝固のポイントは用手法でみる限りでは、分かり難い印象を受けます。そして塩化カルシウム濃度を上げると、一層凝固のポイントは分かり難く、時間をかけてゼリー状に固まります。むしろ通常の2分の1、0.0125Mの塩化カルシウムの方が、凝固点はわかりやすく、時間も短縮します。ただし、正常検体をバッファーで希釈し、 APTTの延長をみていくと、1.2倍程度までの希釈ではAPTT時間は変化しません。このような結果から、少なくとも血液検査で一般に利用されている濃度のEDTAは、凝固検査に適しているとは言えません。それに加えて、標準血漿や凝固因子欠乏血漿はクエン酸ナトリウムを用いて採血されたものですから、 EDTA採血された検体では、各凝固因子の定量測定は不可能となってしまいます。　このように、クエン酸ナトリウムは使い易く、既に標準化されていますが、今のところEDTAについて十分な検討はなく、標準化もされていないので、臨床検査に用いることはできません。【参考文献】 [1] F.W. Fifieid and D. Kealey ：分析化学Ｉ、1998、丸善 [2] 黒川一郎他：臨床検査科学、1983、南山堂 [3] 福武勝博他：血液凝固止血と血栓下巻、1982、宇宙堂八木書店 [4] Biggus. R. and Douglas , A. S.：The thromboplastin generation test. 1953、J. Clin. Path. 6: 23-29 （1998年11月8日　認定臨床検査医　腰原公人(No.338)、福武勝幸 (No.255)）

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