既出の質問であればすみません。

質問

既出の質問であればすみません。
自分は脾臓細胞の研究を行ってます。今まではvivoでの検討が主だったのですが将来的にはvitroの検討をしたいと思っています。しかし試しに脾臓細胞をプレートに入れ培養しFACSで解析しようとトリプシン処理をしたころプレートからはがれませんでした。しかし実験系上どうしてもFACSを使用したいのでプレートから細胞を分離させたいです。
もし脾臓細胞を使っていらっしゃって同様の実験操作を行っているのであれば、どの試薬あるいはどういう方法で細胞分離をされたのか教えていただきたいです。よろしくお願いします。

回答No.1

DoubtOwl

どういった操作をなさったのか分からないため一般的なことを書いておきます。

まずプレートは細胞培養用のを使用してますよね？
トリプシン処理をする前にPBSで2回ほど洗浄してください。
それでもはがれなければトリプシン/EDTAを使用してください。

トリプシン処理の時間は細胞によって違います。
長くても10分程度だと思います。

また、細胞によってはコンフルエントにならないとはがれにくい細胞などもあります。