濃度計算

質問

本当に困っております。
２つのサイトカインを一緒に入れるときの計算の仕方がわかりません。
明日には細胞を撒かないといけなくて、どのように計算したらよいか教えてください。
＜実験方法＞
(1)９６wellプレートに100μｌの懸濁液（サイトカイン2種類入れて）を撒く
撒くときのサイトカイン濃度は、両サイトカイン共に、0、1、5、10、25、50（ng/ml）に設定して、両サイトカインを混ぜる（計36well）
例えば、サイトカインＡとサイトカインＢをそれぞれ懸濁液に50ng/ml入れて反応を見る実験です。

(2)細胞濃度は1×10＾５乗cell/ml
(3)サイトカインＡの現在の濃度5μg/ml10μｌ、サイトカインＢの濃度は100ng/ml 5μｌある。

サイトカイン濃度が違うため、２つのサイトカインを入れると懸濁液の体積変化がおこるので、どのように計算したらよいのかわかりません。

ひとつのサイトカインを入れると、体積も変わるので、もうひとつのサイトカインを入れるときはその変化に応じて入れないとだめですよね？

計算がかなり複雑になるので、サイトカイン量を決定して、懸濁液で濃度調整する仕方はありませんでしょうか？
簡単な計算の仕方を教えてください

回答No.1

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A、Bともに50 ng/mlで入れる場合を例として回答します。

細胞濃度が1×10^6 cells/mlの懸濁液を用意する。
Aのストック：5 ug/ml
Bのストック：100 ng/ml

細胞は10倍希釈、Aは100倍希釈、Bは2倍希釈すればいいので、
総量100 ulなら、
細胞を10 ul
Aを1 ul
Bを50 ul
これで計61 ul
残りの39 ulを培地
これで計100 ul
n=6でやるなら、6.5倍くらいの量を作ればいいと思います。

以上で、要求されたものはできると思いますが、Bが足りませんね…
何か思い違いをしていたらごめんなさい。