菌液の均一な撒き方のコツを教えてください

質問

コンラージ棒を用いて、形質転換した菌液を希釈別にLB固体培地に撒く作業が上手くできません。
先輩、先生に教えて頂いたやり方を実践していますが、菌が中央に寄ったり、ドーナツの様になったり、コンラージ棒の跡が残ったり、コロニーの大きさに差が在りすぎたりします。

塗り方：
1) まず中央に10μlの滅菌水をアプライし、コンラージ棒で適当に伸ばして固体培地の湿り具合を簡単に確認
2) 次に菌液を50μlアプライ→回転台を回しながら、コンラージ棒で縦の動きで伸ばす
3) 回転台を回しながら、固体培地の端にコンラージ棒を置き、かたむけながら徐々に中央に寄せる（端から中央にかけてまばらに菌を広げる）
4) 滑りが少し悪くなる迄2)～3)を繰り返す

主な原因として：
1） 菌液が濃すぎる
2） 塗り方に問題
3） コンタミが一部で起こっている
4） 菌のサンプルによって均一にならない（具体的な原因は解らないが）
等を考えています。

以上です。改善すべき点やその他の原因をお持ちでしたら、ご意見を頂けると嬉しいです。宜しくお願いします。

回答No.1

oil-sour · ベストアンサー

習うより慣れろの問題かもですが、
菌液のボリュームをもうちょっとおおくしてもいいかと思います。

100μlくらいでどうでしょう。

お礼

＞＞習うより慣れろの問題かもですが、
確かにおっしゃるとおりですね。
修行期間と思い、忍びつつ、経験を積みます。

わかりました、100μlで参考にさせて頂きます。
回答有難うございました！