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小腸のホモジナイズの仕方
小腸の酵素を測るために、ポッター型ホモジナイザーで小腸組織をホモジナイズをしようとしています! しかし、膜は筋肉が多いため、中の粘膜をとって、それをホモジナイズしようとしています。。。 そこで、詳しいやり方、また経験のある方で何かアドバイスなどありましたら、教えてください!!! バッファーの量なども知りたいです。。
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正しいかどうかはわかりませんが、実際にやった方法を書きます。 生理食塩水の中で 腸に一筋切り目を入れて開き、少しふるう程度に汚れを落とします。 次に、軽く振り水気を落としてからシャーレなどの中で、カバーガラスで粘膜表面をなぞります。力を加えすぎると破けたり、必要のないところまでけずれてしまいます。 ただそれだけです…。注意点として、RNA量の測定などですと、削り方の違いで差が出ることもあります。
お礼
回答ありがとうございます! やはり、削り方での誤差が欠点になりますよね。。。 同様に実験してみたいと思います。ありがとうございました。