締切済み 酵素について 2007/06/21 22:45 １）リソソームならびにそこに含まれる酵素っていうのはなんなんでしょうか？？ ２）タンパク質の精製し、その性状を明らかにすることがどのような社会貢献となるのですか？？ みんなの回答 （1） 専門家の回答 みんなの回答 MIYD ベストアンサー率44% (405/905) 2007/06/22 08:03 回答No.1 1 リソソームとその溶液に含まれる他の酵素という意味です 溶液中に目的のリソソーム以外にも酵素が含まれている場合に使われます 2 新しいタンパク質の性状を見つける ↓ その成果で研究費をとってこれる ↓ 機器や試薬、消耗品を注文できる ↓ それらを生産するために、現在失業中の人が雇われる ↓ 失業率が減少する 広告を見て全文表示する ログインすると、全ての回答が全文表示されます。 通報する ありがとう 0 カテゴリ 学問・教育自然科学生物学 関連するQ&A 酵素の精製について 酵素の精製について、個人的に興味があって勉強をしています。 カラムを使用した酵素の精製では、溶出液の酵素活性を測定するとともに タンパク質を定量するとのことですが、 (1)酵素活性だけでなく、タンパク質も定量するのは比活性を求めるためですか？ (2)一般的に、比活性がどのくらいになれば精製ができている、というような 値があるのでしょうか？ よろしくお願いします。 酵素活性の比較 いつもお世話になっています。 動物組織から精製したタンパク質について酵素活性を測定しています。 酵素はモノアミンオキシダーゼという酵素で、基質はbenzylamine hydrochloride です。 緩衝液にはk-phosphate pH7.4を用いています。 250nmの吸光度変化を測定し酵素活性を求めているのですが、吸光度はリニアに変化しており、きちんと測定できているように思います。 しかし、結果が思うようではありません。 コントロールでもうまくいかないのです。 これは計算方法も間違っているのではないかと思い質問しました。 精製前のタンパク質と精製後のタンパク質の酵素活性を測定し比較する場合、mg proteinあたりの酵素活性を求めて比較するということで良いのですか？ それとも、タンパク質のTotal volumeをかけてTotal同士を比較するものなのでしょうか。 どなたかご教授お願いいたします。 リソソーム内の酵素について リソソームの消化作用についての質問です。 ファゴソームやオルガネラをリソソーム内に取り込んで（融合して） 加水分解酵素などにより消化する作用のほかに、 リソソームが破れ、中の酵素がサイトゾルに放出され、 細胞全体の自己消化のようなことが起こると 授業で習った気がします。 この、後者のような場合の説明のときに 「リソソーム＝自殺袋」というふうに 説明されていたのが興味深かったのですが、 リソソームの中の酵素の最適pHが5.0付近だとすると、 Cytosol （pH 7.2）にいったん放出されれば 活性を（ある程度）失いそうに思えます。 それでもリソソームは「自殺袋」なのでしょうか？ どうぞよろしくお願いします。 天文学のお話。日本ではどのように考えられていた？ OKWAVE コラム 酵素の精製 疎水性の高い酵素を精製をしています。 しかし、陰イオン交換カラム、疎水性のカラムにもほとんど吸着しません。タンパク質のアグリゲーションを疑っていますが、アグリゲーションだと証明する方法を教えて頂けないでしょうか？もし、アグリゲーションなら、それを防ぐ対策も併せてお教えください。 使用している酵素は、大腸菌JM109を宿主として発現させた酵素です。外部分泌酵素ではありません。 酵素で酵素は消化されないのか？ ちょっとした疑問ですが、たんぱく質を分解する酵素っていくつかありますよね。 ですが酵素もたんぱく質ですよね、 そこで思ったのですが、 たんぱく質を分解する酵素によって同じ酵素を分解してしまうことってないのでしょうか？ よろしくお願いします。 指標酵素って？ レポートで ミトコンドリア、リソソーム、ミクロソーム それぞれの指標酵素とは何か？という問題がでました。 調べてもよく分からないので誰か教えてください ちなみに指標酵素というのは 『特定の細胞や細胞小器官に局在する酵素』でいいのでしょうか？ 酵素活性がない!? ある植物由来のタンパク（酵素）を大腸菌内で発現させて取り出し、酵素活性を測定したのですがまったくありませんでした。詳しい情報は以下の通りです。 遺伝子の鎖長：約800bp 使用したベクターDNAと大腸菌の組み合わせ： (1)pQE30×M15[pREP4] (2)pET26b(+)×BL21(DE3) (3)pET32b(+)×BL21(DE3) 発現条件： 37℃で培養しO.D.600=約0.6のとき1mMになるようにIPTGを添加し、25℃で培養。 その後、タンパクを抽出し、Ni NTA Agaroseカラムで精製しました。SDS-PAGEによる確認でも目的タンパクが発現していること、精製ができていることを確認しています。活性測定はその種類の酵素では一般的に用いられている方法で行っているので問題はないと思われます。 どなたかよろしくお願いします。 酵素の活性 粗抽出液に含まれる酵素と精製酵素との違いは何ですか？ また、粗抽出液の酵素の活性を測定する場合、精製酵素に比べ注意しなければいけないことがあれば教えてください。 酵素の精製 DEAE-クロマトグラフィーで粗酵素液を精製しました。そして、ある特定の酵素を精製して取り出しました。でもまだその酵素以外にもまだいろいろ混ざっているということでさらに精製する必要があるんだと思います。そのように更に精製を進めるためにはどんな方法が有効とされますか？まさかもう一度DEAE-クロマトグラフィーで精製するのですか?? また、（粗酵素液流入後）なぜNaCｌの濃度の違う緩衝液をその陰イオン交換体カラムにNaCｌ濃度の低い順に流しいれていったのかよくわかりません。 入れ歯洗浄剤の酵素反応 入れ歯洗浄剤（商品名：ポリデントやタフデントなど）の成分ならびに含まれる酵素とその作用について、ご存知の方がおられたら教えてください。特に酵素に関して、どのようなタンパク質分解酵素なのでしょうか？それとも、企業秘密かな？ 酵素はどのように作られるのか。 腸内で大量の酵素が作られるそうですが、どういう流れで酵素が作られるのか教えてください。 私の脳内では 口からタンパク質を摂る → ？？？ → ？？？ →酵素。 どこで、どうなって、口から摂ったタンパク質が、酵素になるのか。 説明ねがいます。 生体内の酵素について 酵素は化学変化をおこすのに必要なタンパク質だと書かれているのを読みましたが、1つの生体内に酵素以外のタンパク質はあるものなんでしょうか？ 「タンパク質にリン酸を結合させる酵素をキナーゼといいます。」と本に書いており、リン酸が酵素キナーゼなんでしょうか？そもそも酵素に別の酵素が結合するものなんでしょうか？それとも酵素ではないタンパク質にキナーゼという酵素が結合して化学変化をおこしているのでしょうか？ タンパク質は生体内に必ずあるとも書いてあり、化学変化をおこすのに酵素というタンパク質も必要と書いてあったので、生体内には少なくとも2種類以上のタンパク質があるということですか？タンパク質の種類は沢山の種類があるとも書かれており、よく分からなくなってきました。 日本史の転換点？：赤穂浪士、池田屋事件、禁門の変に見る武士の忠義と正義 OKWAVE コラム 酵素について タンパク質分解酵素についてですが、確か酵素の主成分もたんぱく質ですよね。なんでその酵素自体を分解してしまわないのでしょう？あともうひとつ。酵素は基本的（pHも温度も最適として）に二酸化マンガンのように無くならないと習ったのですが、それでは酵素が永遠に増え続けてしまいませんか？学校の先生はそれは体機能で調節してるからないとは言いますがよくわかりません。一体どういう機能が働いているのでしょうか？ 酵素精製のタンパク量 培養液からの酵素精製で表を作るとき、 全液量・全タンパク量・全活性が必要ですが 原液、硫安沈殿後、分画後とつづく場合に 硫安沈殿後は透析を行っているハズで、 培地成分の低分子タンパクは流れ出ると思います。 ならば、原液も透析を行ってから タンパク量るのが正しいのでしょうか？ 酵素について はじめまして。 学生です。 さっそくですが、酵素タンパクの発現をする際に２０℃と３７℃で発現させるのとでは、後者の場合酵素が不溶性タンパクになってしまう？ようなこと聞いたのですが、この温度の違いにより可溶性から不溶性に移行していく(しやすい？)のはなぜなのでしょうか？ そもそも酵素はなぜ可溶性に画分されるのでしょうか？ どなたかよろしくお願い致します。 酵素サイトの確認について midiprep kitでプラスミドを精製して、その後目的のインサートが ちゃんと入ってるか酵素で切って確認したのですが、なぜか酵素で 切れなくなりました。minipirepでプラスミドを精製した時は切れて いたのですが、その後midiprepで精製して、miniprepの時と同じ 酵素を使っても切れませんでした。どうしてこういうことがおこるので しょうか？また、酵素で切れない時はどうやってインサートを確認 したらよいのでしょうか？シーケンス以外に確認できるやり方って ありますかねえ。。。 ちなみに酵素は、Kpn1と BamH1を使って切りました。 酵素と酵素反応に関して どうしてもこれらの問題が分かりません(>_<);; 以下の記述に誤りがあります。 1.動物細胞由来の酵素には、反応の至適pHが酸性のものはない。 2.基質分子と酵素たん白質との結合は、主にイオン結合である。 3.酵素反応の最適pHは、酵素たん白質の分子量により決まる。 4.反応液中の塩濃度は、酵素反応の最適温度には影響をあたえない。 どこがどういう理由で誤っているのか教えてください！ どれを調べても載ってませんでした。；； 酵素精製について 酵素精製では，精製を進めるにしたがって グレードの高い充填材を使うと教科書に書いてあります． グレードの高い充填材が手元にない場合， 同じゲルで再度クロマトをすると，きれいに精製できますか？ 酵素について 疑問なのですが、 核酸でできた酵素よりもなぜタンパク質でできた酵素の方がとても多いのですか？？ 構成物質のSとPの違いでしょうか？？ 教えてください。 酵素が樹脂にくっつかないんですよ～(*_*;) 今ある酵素を原株から精製してるんですけど、陰イオン交換・陽イオン交換・ハイアパ・疎水樹脂っていう一般的な樹脂に通したんですが、何にも全くくっつかないんですよ。 もちろんイオン交換では安定範囲でpH変えて（陰イオンではpH上げて、陽イオンではpH下げてって感じで）るんですがダメで、疎水でも硫安濃度変えたりしてみたんですがやっぱダメなんですよね。。。これってほんとにタンパク??って感じなんですが、間違いなくタンパクなことは確かなんですよね。。。 挙句の果てにゲルろ過でも全然分けられないんですよ。これはおかしいってことで色々検討した結果、細胞破砕片みたいな茶色い成分に酵素がくっついてるんじゃないかって思ってきたんです。なので、細胞破砕片から酵素をはがさないといけないんで、界面活性剤なんか試してみたんですが、どうもよろしくないんですよね。クルードなんかオイリーな感じもするし、何かしらの前処理必要なのかなって思案を巡らせてみたりもしてるんですが。。。どうしたら樹脂にくっつけれるんだー(*ロ*)と五里夢中の私に知恵を貸してくださいm(_ _)m 注目のQ&A 「You」や「I」が入った曲といえば？ Part2 結婚について考えていない大学生の彼氏について 関東の方に聞きたいです 大阪万博について 駅の清涼飲料水自販機 不倫の慰謝料の請求について 新型コロナウイルスがもたらした功績について教えて 旧姓を使う理由。 回復メディアの保存方法 好きな人を諦める方法 小諸市（長野県）在住でスキーやスノボをする方の用具 カテゴリ 学問・教育 自然科学 理科（小学校・中学校）化学物理学科学生物学地学天文学・宇宙科学環境学・生態学その他（自然科学） カテゴリ一覧を見る OKWAVE コラム 突然のトラブル？プリンター・メール・LINE編 携帯料金を賢く見直す！格安SIMと端末選びのポイントは？ 友達って必要？友情って何だろう 大震災時の現実とは？私たちができる備え 「結婚相談所は恥ずかしい」は時代遅れ！負け組の誤解と出会いの掴み方 あなたにピッタリな商品が見つかる！ OKWAVE セレクト コスメ化粧品 化粧水・クレンジングなど 健康食品・サプリ コンブチャなど バス用品 入浴剤・アミノ酸シャンプーなど スマホアプリ マッチングアプリなど ヘアケア 白髪染めヘアカラーなど インターネット回線 プロバイダ、光回線など
