インスリンの定量

質問

インスリンの定量について教えてください。現在膵臓β細胞の培養細胞から分泌されるインスリンを測定しようとしています。インスリンのELISAはたくさんの種類市販されているのですが、現在使っている細胞がハムスター由来で、当然ハムスター由来のインスリンを測定するキットは販売されていません。マウスやラットのインスリンELISAで測定できるかもしれませんが、できればハムスター由来のインスリンにクロスする抗体を使ったELISAを購入したいと思っています。細胞はHIT-T15（大日本住友製薬から購入）という名前の細胞です。もし情報お持ちでしたら教えてください。

回答No.1

MIYD · ベストアンサー

使ったことはありませんが、

このキットはハムスターインスリンへのSPECIFICITYが100%と書いてあります
http://www.lincoresearch.com/products/ri-13k.html
http://www.sceti.co.jp/medical/PdfFiles/LINCO/Sensitive_Rat_Insulin_RIA_kit.pdf

こちらは79%あるようです。
http://www.crystalchem.com/products/RatInsulinKit.html

ハムスターインスリンのスタンダード
http://www.shibayagi.co.jp/Prod-E/ASIN-001E.pdf
と組み合わせれば定量できるのではないでしょうか。

RIAはできない環境なのでしょうか
HIT-T15細胞でRIAで測定している論文があるみたいです。
http://www.e-emm.org/article/article_files/emm32-1-2.pdf
http://endo.endojournals.org/cgi/content/full/139/9/3752
http://endo.endojournals.org/cgi/content/full/141/7/2350

お礼

RIAは使えない状態なので、通常のELISAキットを探しておりました。非常に参考になりました。ありがとうございました。

回答No.2

ADEMU

インスリンの定量とありますが、今、市販されているキットのほとんどはＩＲＩ（immunoreactive Insulin)、つまりインスリンの抗体と反応する物質を測定しているにすぎません。抗体にもよりますが、プレプロインスリン、プロインスリン、インスリン、インスリン様物質、フラグメントなど抗体と反応しそうなものを全て量りこんでいるといって間違いありません。
培養細胞がいきなりインスリンを産生するとは思えませんので、そのあたりを注意されてはと思います。

お礼

アドバイスありがとうございます。もう一度インスリン分泌のメカニズムを勉強した上で実験を始めようと思っています。ありがとうございました。