oligo dT カラム の再使用について 教えてください

質問

total RNAからmRNAを精製しています。
それでアマシャム製のoligo dTカラムを使用しているのですが、
　これはリユース可能なのでしょうか？
可能だとしたら何回くらい大丈夫なもの
なのか教えていただきたいと思います。

　一度使った後には、high bufferを入れて保存
しておいています。

　よろしくお願いします。

回答No.1

geneticist12 · ベストアンサー

貧乏なラボにいたので、目標10回、最低でも5回は再生して使い回したものです。だいたいは、Oligo-dTの結合能がおちるより、不純物が蓄積して流速がおちるのが原因で引退します（それでも、いざというときのためにとっておくのですけど）。
ただ、cDNAライブラリーの作製や、RT-PCRに使うときはお勧めしません。わたしは、主にNorthern用のサンプル調製用にしていました。

カラムを再生するときは、0.1N NaOHを2 bed-vol、次に純水を10 bed-vol （流出液をpHペーパーではかり、中性付近になるまで）ほど通して、最後に、Elution bufferかHigh Salt Bufferにでも置換して保存します。防腐剤としてアジ化ナトリウム（0.02 %ほど）をいれるといいでしょう。