遺伝子ノックアウト

質問

cre/lox pシステムなどを用いた遺伝子ノックアウトとRNAiなどを用いた遺伝子ノックダウンの違いを教えてください。

回答No.3

overthisgraysky · ベストアンサー

creはリコンビナーゼ（ＤＮＡ組み替え酵素）、loxはcreの認識配列です。
creを発生時期特異的あるいは組織特異的に発現させることで、時期特異的・組織特異的に標的遺伝子をノックアウトすることが出来ます。

RNAiでは、siRNAが標的遺伝子のmRNAを認識し、一連の反応の後で標的遺伝子mRNAを細切れにします。
siRNAの量によって（？）全てのmRNAを破壊できるわけではないので、致死性の遺伝子の抑制に役立ちます。
時期特異的にsiRNAを導入することもできます。
また、時間が経ってsiRNAが分解されれば遺伝子の抑制も解除されるようです。

お礼

ご回答ありがとうございました。
ひとつ質問させていただいてよろしいでしょうか。
siRNAが分解されれば遺伝子抑制も解除されるそうですが，その個体が生存している間，常に遺伝子抑制が働くようにすることはできないのでしょうか？例えば寿命が短い生物では可能であるが，長い大動物などで常に遺伝子機能抑制を行うためには，組換えDNAなどを用いたノックアウトを行うという感じになるのでしょうか？

回答No.2

rnai

DNA（遺伝子）→RNA→タンパク質という流れで、cre/loxは、組み換えDNAを利用することで、遺伝子ノックアウトマウスなど作ることができるようです。つまり、DNAレベルで蛋白の発現を抑制しているみたいです。
一方、RNAiとは、siRNAと一般的にいわれますが、２０塩基ぐらいの小さなRNAを入れて上げると、RNAにsiRNAがくっつき、RNAが２重鎖（ハイブリッとを形成します）になるので、（自然界にRNAの２重鎖はありえないので、）生体では異物としてそのRNAを破壊してしまいます。つまりRNAレベルでの蛋白発現抑制です。
　実際には、ある蛋白Aを抑制したいのであれば、蛋白AをコードしているRNAの一部（siRNA）を入れて上げると、その蛋白AをコードしているRNAが壊れます。

cre/lox pシステムは使ったことがないので、自信がないです。

お礼

ご回答ありがとうございました。
なるほど，そういうことだったんですねー。

回答No.1

ok_web

cre/lox pシステムというのは知りませんが、ノックアウトとはDNAレベルでの遺伝子の破壊。ノックダウンとは、RNAレベルで遺伝子の機能を抑制することだと聞いたことがあります。

お礼

ご回答ありがとうございました。非常にわかりやすいです。