ベストアンサー SOC培地について 2010/05/22 23:47 SOC培地について 大腸菌に組み換えプラスミドDNAを導入した後にすぐにSOC培地を加えたのですが、なぜSOC培地を加えたのですか？ また、SOC培地とはなんですか？ わかる方回答おねがいします。 みんなの回答 （1） 専門家の回答 質問者が選んだベストアンサー ベストアンサー sewingcough ベストアンサー率57% (99/173) 2010/05/23 00:17 回答No.1 普通はプラスミドで形質転換した大腸菌を増やす場合 アンピシリンやカナマイシンなどの抗生物質で選択するわけですが、 形質転換した大腸菌をそのままプレートに植菌すると 抗生物質で全滅してしまう可能性があります。 なのでプラスミドにコードされた抗生物質への耐性を発現させるために 予め抗生物質の存在しない液体培地で少し培養する必要があります。 そのために、形質転換後の大腸菌をSOC培地で培養した上でプレートに植菌します。 特にカナマイシンの様に直接大腸菌にダメージを与える抗生物質の場合 SOCで予め培養しないでプレートにまくと高確率で全滅します。 ちなみにSOCではなく通常のLBでも特に問題はありません。 私は普段SOCではなくLBを使ってます。 でもLBよりもSOCの方がグルコースリッチな培地なので 短時間の培養でも大腸菌が元気になるといわれています。 質問者 お礼 2010/05/23 00:52 回答ありがとうございます。 悩んでいたので、早急な回答助かりました。 抗生物質への耐性を発現させる為にSOC培地を使用したのですね。 わかりやすい説明で理解することができ、ありがとうございました。 広告を見て全文表示する ログインすると、全ての回答が全文表示されます。 通報する ありがとう 0 カテゴリ 学問・教育自然科学生物学 関連するQ&A SOB培地とSOC培地 大腸菌の培地の中に、SOC培地というものがありますが、私はこれを形質転換後のインキュベーション時にしか使用したことがありません。なぜ、形質転換後だけSOC培地を使うのでしょうか？そのほかに使用する場面はないですか？また、もしSOBを使用するというプロトコールの中で、SOCを使った場合どうなりますか？？(例えば、コンピテントセルを作る時など…) SOC培地 プラスミド合成についての質問です。 カナマイシン耐性プラスミドを増やす場合、カナマイシン含有プレートにまく前にSOC培地でコンピテント細胞を30-45分培養する必要があるのはなぜでしょうか？ 宜しく御願い致します。 TB培地の利用法 DNAをたくさん採りたかったため、大腸菌をTBで培養したのですが、望む収量を得られませんでした。 後で調べたところ、濃すぎても菌が死滅したりして良くないとか（大抵はLB、濃いものでもYTで培養するそうで・・・）。 では、TB培地は何をするときに使う培地なのでしょうか？ 天文学のお話。日本ではどのように考えられていた？ OKWAVE コラム プラスミドを用いて蛋白質を用いる場合 大腸菌にプラスミドを導入して、形質転換して大腸菌を大量に培養した後に、目的の蛋白質を取り出そうとした時に、疑問をもったのですが、 大腸菌などは核内にあるDNAからRNAを作り、RNAを翻訳して蛋白質を合成します。 そうなると大腸菌にプラスミドを導入した時に、プラスミドは大腸菌の核内に導入されたと考えていいのでしょうか？ 目的遺伝子のクローニングについて 大腸菌にプラスミドDNAを入れ、目的遺伝子を複製させる簡単な実験ですが、このとき、大腸菌に入るプラスミドDNAの個数というのは、大量かつ正確にクローニングするための条件として、何か関係性があるのでしょうか？どれくらいの個数を取り込ませた大腸菌が一番よいのでしょうか？ もともと大腸菌にはプラスミドDNAが寄生している状態で存在しているので、複数個のプラスミドDNAが入り込んでも問題はないと考えました。もし大腸菌が1個だけプラスミドDNAを取り入れたとき、何か不都合がない限りは、1個でも複数個でも関係ないと考えました。 ちょっとネットで探してもよくわからなかったんで、ご回答のほうをよろしくお願いします。 大腸菌の形質転換の実験について 大学生です。 現在、大腸菌に形質転換を行い、その組み替えたDNAの種類を見分ける実験をしています。プラスミドDNAには、アンピシリン耐性の遺伝子と、ラクトースオペロンＺの遺伝子が組み込まれています。 そこで、気になった事について質問したいです。 まず、形質転換した大腸菌を培養したのですが、そのコロニーについて ○どうしてコロニーは丸形なのでしょうか？ ○たまにひょうたん形をしたコロニーがいますが、なぜでしょうか？ ○また、そのコロニーを楊枝でつつき、LB培地で培養したのですが、 つついた楊枝にはどれ位の大腸菌がついているのでしょうか？ ○大腸菌を旋回培養する際、目(目はないが)がまわらないのでしょうか？ ○そもそも、LB培地の役割は何なのか ○組み替え率と形質転換率を調べるには、なんの数値を参考にしたらよいのか 質問が多くて申しわけありません。調べてもわからなかったので、よろしくお願いします。 大腸菌の形質転換とアンピシリン 大腸菌の形質転換実験を行いました。 大腸菌のコンピテンとセルにプラスミドを導入させ、それをアンピシリン含有LB寒天培地で培養しました。 培養後、形成されたコロニーを採取し、次は、坂口フラスコ内でアンピシリンを加えた液体培地で培養しました。 ここで、培地にアンピシリンを添加する理由を教えていただきたいのです。 LB寒天培地にアンピシリンを添加するのは、プラスミドを導入した大腸菌のみを培養するためだと思います。 では、坂口フラスコでの培養でアンピシリンを添加するのはなぜでしょう？自分なりにいろいろ調べたところ、「プラスミドを抜け落ちないようにするため」ということを知りましたが、これはどういうことなのでしょうか？ なぜ抜け落ちるのか、なぜアンピシリンを添加すると抜け落ちないのか、ということがよくわかりません。 ご存知の方は教えて下さい。よろしくお願いします。 サルモネラ培地について 今、大学の食品衛生学実験で、大腸菌とサルモネラ菌の特定をしています。 サルモネラ培地を用いてサルモネラを識別する方法もしていますが、サルモネラ培地には大腸菌も検出されることがあるのですか？ サルモネラ培地というのはサルモネラ属を選択的に培養できるものだと教わりましたが、そのほかの菌も検出されてしまうのでしょうか？それとも実験ミスでしょうか？ 大腸菌を識別するために他の方法も行っていて、ほぼ大腸菌だと思うのですが、サルモネラ培地にも陽性がでています(>_<) 詳しい方、よろしくお願いします!! 大腸菌が生えない培地 接合法で大腸菌を使って形質転換をやっているのですがなかなかいい選択培地が見つかりません。探している選択培地はエンテロバクター、パントエア、バークホルデリアに対しての選択培地か大腸菌だけが生育しない培地です。どなたか知っている方教えていただけませんか。お願いします。 大腸菌の形質転換 lacZαが欠損した大腸菌にlacZαをもったプラスミドDNAを導入（形質転換）し、IPTG＋X‐galを含んだ培地とX‐galのみを含んだで培地で培養しました。 X‐galのみを含んだ培地では白いコロニーができるはずですが、薄い青コロニーができました。 また定量的にも微量にβ-ガラクトシダーゼが検出されました。 どうしてX‐galのみを含んだ培地では白いコロニーではなく薄い青コロニーができたのでしょうか？ プラスミドの大量調製 題字の如くなのですが、プラスミドの大量調製が思いのほかうまくいきません。培養の際の培地を500mlないし1lで大腸菌を増やしているのですが、大腸菌自体はばかばか増えるのに、そこから得られるプラスミドが10μgくらいしかありません。low-copy plasmidかとも疑い、培地の量をかえてトライもしてみましたが、こちらでもうまくいかないんです。 培地には抗生物質を添加しているので、プラスミドを持たない大腸菌が急増するということは考えにくいですし、やはり細胞内でのコピー数が少ないと考えています。 このようなプラスミドの収量を上げるには、どうすれば良いでしょうか？具体的な数字で表すと、100μgは取れるといいのですが。 何か工夫すべき点がありましたら、ご教授願います。 形質転換 大腸菌の形質転換の学生実験（lacZ遺伝子に挿入して、X‐galを含んだ培地で培養）で白色コロニーからプラスミドDNAを回収したんですが挿入DNA が入っていませんでした。この理由を教えてください。 また（薄い）青コロニーからプラスミドを回収したらDNA断片が挿入されていました。この理由も教えてください。 日本史の転換点？：赤穂浪士、池田屋事件、禁門の変に見る武士の忠義と正義 OKWAVE コラム 形質転換の実験で・・・ 形質転換の実験でコンピテントセルとプラスミドを 混合しプラスミドを大腸菌に導入後、アンピシリンを含まない 培地で37度で1時間ほど培養するという操作はなぜ必要なのですか？ その間に何が起きているのでしょうか？ わかる人いたら教えてください。 大腸菌の形質転換について 先日、「大腸菌の形質転換」の実験をしました。 pUC系プラスミドを用いました。 ＜使用した培地＞ (1)LB培地のみ (2)LB培地＋アンピシリン (3)LB培地＋X-gal (4)LB培地＋アンピシリン＋X-gal ＜予想＞ ・-DNA (1)白 (2)- (3)白 (4)- ・+DNA (1)白 (2)白 (3)青 (4)青 ＜結果＞ ・-DNA (1)白 (2)- (3)白 (4)- ・+DNA (1)白 (2)- (3)白 (4)白 ＜予想＞は合っていますか？ ＜結果＞では、なぜ(2)が-なのに(4)では菌は生えたのでしょうか？ 形質転換自体は失敗してコンタミしたのでしょうか？ デソキシコレート培地 大腸菌がデソキシコレート培地で生育したらなぜ、赤変するんですか？？ DOC培地とは 先日、DOC培地ならば滅菌しなくても大腸菌以外は出てこないと習ったのですが何故ですか？ 微生物の液体培地と平板培地の違い 私は先日、土壌サンプルから大腸菌を培養するといった実験を行いました。 培養に使った培地は液体培地のBGLB培地と平板培地のデゾキシコレート培地です。 培養後、BGLB培地に入れたダーラム管に気泡が入っていたことから、サンプルに大腸菌が存在していることは分かったのですが、平板培地のデゾキシコレート培地にはコロニーを形成しませんでした。 なぜ液体培地には生えるのに、平板培地には生えなかったのでしょうか？ ちなみに培養時間は１日です。コロニーを作るのに時間がかかることや世帯時間が関係するのかなと思うのですが・・・。 液体培地による酵母の保存 こんにちは。早速質問です。 あるタンパク質をコードする遺伝子を導入したプラスミドをもつ酵母について、プレートにまいた酵母のシングルコロニーを液体培地に移して前培養しました。この後、一部を発現培地に移したのですが残った液体培地は４℃で保存しておけばしばらくの間は使うことができるのでしょうか？プレートでは２～３週間でプラスミドの脱落が見られました。プレートと液体培地は同じ成分で、寒天が入っているかどうかの違いです。 大腸菌の形質転換について 蛍光タンパク質GFP遺伝子を持つプラスミドPGLOを、大腸菌に導入するという実験を行ったのですが、L-アラビノースの培地で培養したら蛍光を発したのに、D-アラビノースの培地で培養しても蛍光を発しませんでした。 この二つがプロモーターに及ぼす影響の違いを教えてください。 大腸菌からのプラスミド抽出 現在工学部の大学院生です。 初めて生物的な研究をしますので、初歩的な質問ですみません。 大腸菌からプラスミドを取り出しているのですが、その前段階について質問します。 まず、プラスミドが導入されていないDH5αを、液体培養しております。 少量培養を8h、大量培養を16h行っております。 その際、アンピシリン溶液1mg/mlを、0.1ml(アンピシリン)/ml(培養液)となるように加えております。 そこで、質問させていただきます。 ・プラスミドが導入されていないDH5αですが、大量培養後の大腸菌はプラスミドは入っていますか？ ・培養時間は適切ですか？ 先輩が言うには、アンピシリンを入れているので、プラスミドを持つ大腸菌以外は死滅するから、最初に導入しなくても良いと言います。 自分の疑問としては、プラスミドをもつ大腸菌が少なくなってしまうので、のちのプラスミド精製濃度が少なくなってしまうのではないかな、と思ってしまいます。 初歩的な質問ですが、よろしくお願いします。 注目のQ&A 「You」や「I」が入った曲といえば？ Part2 結婚について考えていない大学生の彼氏について 関東の方に聞きたいです 大阪万博について 駅の清涼飲料水自販機 不倫の慰謝料の請求について 新型コロナウイルスがもたらした功績について教えて 旧姓を使う理由。 回復メディアの保存方法 好きな人を諦める方法 小諸市（長野県）在住でスキーやスノボをする方の用具 カテゴリ 学問・教育 自然科学 理科（小学校・中学校）化学物理学科学生物学地学天文学・宇宙科学環境学・生態学その他（自然科学） カテゴリ一覧を見る OKWAVE コラム 突然のトラブル？プリンター・メール・LINE編 携帯料金を賢く見直す！格安SIMと端末選びのポイントは？ 友達って必要？友情って何だろう 大震災時の現実とは？私たちができる備え 「結婚相談所は恥ずかしい」は時代遅れ！負け組の誤解と出会いの掴み方 あなたにピッタリな商品が見つかる！ OKWAVE セレクト コスメ化粧品 化粧水・クレンジングなど 健康食品・サプリ コンブチャなど バス用品 入浴剤・アミノ酸シャンプーなど スマホアプリ マッチングアプリなど ヘアケア 白髪染めヘアカラーなど インターネット回線 プロバイダ、光回線など
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回答ありがとうございます。 悩んでいたので、早急な回答助かりました。 抗生物質への耐性を発現させる為にSOC培地を使用したのですね。 わかりやすい説明で理解することができ、ありがとうございました。