締切済み ＥＬＩＳＡ法 2009/08/05 22:18 ＥＬＩＳＡのサンドイッチ法で、なぜ目的物質の量を測定することができるか教えてください。よろしくお願いします。 みんなの回答 （1） 専門家の回答 みんなの回答 bioxyz ベストアンサー率94% (17/18) 2009/08/06 21:49 回答No.1 単に仕組みがわからないということでしょうか？ それとも、測定法のどこかに疑問があって「理屈上定量できないのでは？」と感じてらっしゃるのでしょうか？ どこまで理解していて、あるいは、何故測定できないとお考えなのか教えていただけると回答出来ると思います。 広告を見て全文表示する ログインすると、全ての回答が全文表示されます。 通報する ありがとう 0 カテゴリ 学問・教育自然科学生物学 関連するQ&A ELISA法について プレートに抗体を固相化→抗原反応→検出抗体→HRP標識抗体→検出といった感じのサンドイッチELISA法を構築してタンパク質の検出を行なっています。 しかし、現在測定できる範囲が200pg～1500pgと狭く、測定できる範囲を広げたいと考えています。単純に固相化抗体の量を増やせばいいのでしょうか？他にも方法があったら教えて欲しいです。 ELISA法について 現在、ELISA法（サンドイッチ法）によるタンパク質検出の系を確立しようと考えています。 ブランクの吸光度値は、0.3くらいなんですがこの値は高いのでしょうか？ELISA法初心者なのでどれくらいの値が望ましいのかわかりません。高いとしたらどのような原因が考えられるのでしょうか？ELISA経験者の方いらしたら教えてください。 ELISAについて教えて下さい ELISAでは通常、サンドイッチ法がよく使われると思います。 しかし、がんのスクリーニングで使用されるp53抗体のELISA検出系は、間接蛍光抗体法がよく用いられているようです。 これは抗体を抗原として検出したいときは、間接法を使うというのがセオリーのためでしょうか？ しかし一方で、IgE抗体を抗原とするELISA検出系はサンドイッチ法のものが多いようです。 サンドイッチ法と間接法の使い分けはどのように考えればよいのでしょうか。 ご存知の方いましたらご教示お願いします。 天文学のお話。日本ではどのように考えられていた？ OKWAVE コラム ELISA法に関する質問 ふたつ質問があるので、どちらか回答できるほうだけでもいいのでよろしくお願いします。学生実験でやりました。 １】乳タンパク質をサンプルとして、抗体の生産性に及ぼす影響をELISA法を用いて検討したのですが、結局途中で測定した細胞数に比例したので、培養したあとの細胞数で抗体生産生を判断できないのでしょうか。つまり、細胞数と抗体の量は比例すると思われるのですが、違うのでしょうか？しかし、比例すると考えるとやはりELISA法を用いる理由がわからなくなります。どうかこの疑問に答えてください。 ２】ELISAの操作の初めに固相抗体を結合して、ブロッキングした後、4℃保存しますが、これは何故ですか。説明が足りずにわかりにくければそういってください。 ELISAについて・・・ ELISA法の サンドイッチ法で実験をしています。 最初の抗体を固相化させる段階で抗体の濃度は 全く一緒だけど、量を変えて固相化させたプレート をつくってみました。 具体的には200μｌ/wellを 100μｌ/well に変更して撒いてみました。 すると他の試薬の濃度やLotは全く変わってないのに countが著しく上昇してしまいました。 未熟者なのでいったいどういった原因が考えられる のかわかりません。 希釈の間違い以外で 原因は考えられるものでしょうか？ ELISA法とオクタロニー法について 免疫の実験で、ELISA法とオクタロニー法がありますが、ELISA法とオクタロニー法を比較すると、それぞれどんな長所・短所があるのですか？ 教えてください。よろしくお願いします。 Cell ELISAとELISA HUVECという細胞の表面に発現する接着分子（ICAM-1、VCAM-1、E-selectinなど）を測定しようと考えています。実験方法を論文で調べていて、わからないところがあるので、経験者の方など、分かる方がいらっしゃったら教えてください。２つあるので、分かるほうだけでも回答いただけると幸いです。 １）１つの論文中にELISAとCell-ELISAの２種類が出てきたのですが、これはどう違うのでしょうか？検索したのですが、よく分かりません。 ２）ELISA法では、96wellプレートに細胞を播種しているものが多いように思います。実験系の都合上、ディッシュにしか細胞を播くことができません。ディッシュに播いた細胞でも、ELISAで測定することはできるのでしょうか？マイクロプレートリーダーが96wellでなければいけないのは理解していますが、最初から96wellに播かないと実験できないのでしょうか？ 分かる方がいらっしゃいましたら、ぜひ教えてください。 よろしくお願いします。 実験 誤差 ELISA法 生化学実験でELISA法でウシの血清アルブミンの量を測定しました。 その時結果が含有量より大きな値が出てしまいました。 なぜ、含まれているより大きな値が出てしまうのでしょうか？ また、同時に値を見比べるために、反応しないウシのグロブリンも用いて実験を行いました。 その実験でも、0以上の値が結果として出てきました。 なぜでしょうか？ 試薬のコンタミ以外にどんな理由が考えられるのでしょうか、意見を聞かせてください。 ELISA法におけるブランク 質問タイトルのとおりで ELISA法においてブランクは何のために設定されているのでしょうか。 大学の実験でブランクとして0.5%ゼラチン液を使ったのですが… 宜しくお願いします。 ELISA ELISAで測定値が感度以下の場合、統計学的に評価する場合は0で評価したほうがいいのでしょうか？それとも最低感度の値で評価したほうがいいのでしょうか。教えていただければ幸いです。 ELISAを行う場所について サンドイッチ法ELISAを行っています。抗体のコーティングから自分でしているのですが、一連の操作は、クリーンベンチ内で行った方がいいのでしょうか、それとも、外でよいのでしょうか。 サンプルは培地の上清を回収したものを用いています。 できれば、外で行えると楽なのですが・・・。 基礎的な質問で申し訳ありません。 よろしくお願いします。 ELISA測定について ELISAでヒトの運動前後の血漿中の８－OHｄGを測定することになったのですが、論文を読んでいてもほとんど 運動における血漿中の８－OHｄGを測定をしたものが無く、確認した中では1つも見つけれませんでした。 そのため、運動前後の血漿中の８－OHｄGの値がわからず血漿を測定に際して希釈をすべきかどうか迷っています。 もし、運動前後の血漿中の８－OHｄGの値や運動前後の血漿中の８－OHｄGを測定した論文を知って見える方が見えましたら教えてください。お願いします。 日本史の転換点？：赤穂浪士、池田屋事件、禁門の変に見る武士の忠義と正義 OKWAVE コラム ELISAの原理について 今大学で免疫学の実習を行っています。 ELISA法を行っているのですが、今いちこの原理についてよくわかりません。文献なども参照しましたが部分的なところしか書いておらず、系統的に理解することができません。どなたか教えてくださると助かります。宜しくお願いします。 細胞を抗原とするELISA、固定法について 細胞を免疫吸着剤とするELISA法をためしています。 細胞表面抗原は、グルタルアルデヒド、パラホルムアルデヒドでの固定でうまくいったのですが、細胞内抗原はうまくいきません。 おそらく固定法に問題があるのだと考えています。 アドバイスよろしくお願いします。 ＥＬＩＳＡで「codeする」とはコード化するでしょうか 先ほどの「each run」の者です。 血中オステオポンチン濃度を測定するために、ELIZA（酵素免疫測定法）でアッセイするという記述のところで、次のような箇所ががあります。 「The Osteoponctin Assay Kit（ＸＸＸ社） was used to determine the level of ostepontin; all samples were coded」 この後に標準曲線とか、ＡＵＣ曲線など出て来ますが、「coded」はアッセイ後にコンピュータ処理するために、サンプルをコード化したということでしょうか。多量のサンプルを解析するために、たとえばELISAアッセイとコンピュータが接続されているので、サンプルにコードをふって置くと考えてしまうのですが、実験をやったことがないので判断できません。どうも誤りのような気がします。正答を戴ければありがたい次第です。 ELISAに関して質問です。 サンドイッチELISAの検出系に関して質問です。 全く同じ一次抗体を用いた場合、最もS/N比（シグナルとbackgroundの比）が高くでる検出方法は発色、発光、蛍光の中から選択するとすれば、いずれでしょうか？（二次抗体に用いる抗体部分の特異性も同じと仮定してください。） また、上記以外にもっとS/N比のとれる検出系をご存じてしたら教えていただけますと助かります。 よろしくお願いします。 SDSやELISAなどの違いについて たんぱく質などの定量や定性に用いられるものにSDSやELISA、ウエスタンブロッティング、サザンブロッティング法などがあると思うのですが、それぞれ主にどのような違いがあって、それぞれ用い方がことなるのでしょうか？ また、これらの方法の他にどのようなたんぱく質などの定量や定性法があるのでしょうか？ 1）補体反応についてと2）酵素免疫測定法について 1）感作SRBC表面上では補体の古典経路のみが作動し、副経路やレクチン経路はなぜ反応しないのでしょうか？ 2）ELISA法によるイムノアッセイの測定感度が高いといわれる理由はどこから来たのでしょうか？いろいろ調べてみたのですがELISA法は感度が高いとしか書いてません。 どちらか1つでもいいので回答よろしくお願いします。 ELISAのブランクの吸光度 初歩的な質問となるのですが， ELISA法で吸光度を測定し濃度を算出する際に 標準液及び検体の吸光度から， ブランクの吸光度を差し引きますよね， その時に，ブランクの吸光度が「-0.003」だったとすると 「+0.003」すると考えて良いのでしょうか？ ELISAの固層化の条件について タンパク溶液の中から、抗体濃度を測定するのに、ELISAによる方法を考えています。 Protein A (or G) をコーティングしたプレートを作製したいのですが、適切な固層化の条件(Buffer,反応時間,温度など)を教えていただけませんでしょうか。 またマイクロプレートの吸着性については、どういった種類のものを選べば良いのでしょうか。 注意点や他の方法などもありましたら、教えて下さい。 よろしくお願いします。 注目のQ&A 「You」や「I」が入った曲といえば？ Part2 結婚について考えていない大学生の彼氏について 関東の方に聞きたいです 大阪万博について 駅の清涼飲料水自販機 不倫の慰謝料の請求について 新型コロナウイルスがもたらした功績について教えて 旧姓を使う理由。 回復メディアの保存方法 好きな人を諦める方法 小諸市（長野県）在住でスキーやスノボをする方の用具 カテゴリ 学問・教育 自然科学 理科（小学校・中学校）化学物理学科学生物学地学天文学・宇宙科学環境学・生態学その他（自然科学） カテゴリ一覧を見る OKWAVE コラム 突然のトラブル？プリンター・メール・LINE編 携帯料金を賢く見直す！格安SIMと端末選びのポイントは？ 友達って必要？友情って何だろう 大震災時の現実とは？私たちができる備え 「結婚相談所は恥ずかしい」は時代遅れ！負け組の誤解と出会いの掴み方 あなたにピッタリな商品が見つかる！ OKWAVE セレクト コスメ化粧品 化粧水・クレンジングなど 健康食品・サプリ コンブチャなど バス用品 入浴剤・アミノ酸シャンプーなど スマホアプリ マッチングアプリなど ヘアケア 白髪染めヘアカラーなど インターネット回線 プロバイダ、光回線など
