フローサイトメトリーのネガティブコントロールについて

質問

私は医療系の大学に通う学生です。

フローサイトメトリーについて調べているのですが
ネガティブコントロールについてよくわかりません。

IgGを用いることが多いようですが
これは何に対する抗体でしょうか？

回答No.1

ramp1 · ベストアンサー

免疫学を専門にしている者です。

IgGが何に対する抗体か？とのことですが、実験次第で使用する
ネガティブコントロールの抗体は変わります。

フローサイトメトリーで解析するのに用いる抗体が仮に抗CD4抗体でクラスがIgGならば、対象となる細胞（胸腺細胞など）に発現していない抗原を認識する抗体でクラスがIgGならば、ネガティブコントロールとして使えます。あくまで、非特異的に結合することによる擬陽性を取り除くことが目的です。

モノクローナル抗体ではIgGを作ることがやりやすいのでIgGをネガティブコントロールとしていることが多いのですが、私が行っていた実験では、ウサギに免疫して、取ってきた血清（ポリクローナル抗体）を使ってフローサイトメトリーを行う場合は、ネガティブコントロールとして通常ウサギ（免疫していない）の血清をネガティブコントロールとして使いました。

お礼

なるほど、わかりました。
対象となる細胞に発現していない抗原を認識する抗体なんですね。
ありがとうございました。