ベストアンサー DNAの濃度調整 2007/01/04 09:22 ＤＮＡの濃度を低くしたい時、TE溶液またはdd水で薄めればよいのでしょうか？それとも他の方法がありますか？素人な質問ですみませんが、宜しくお願いします。 みんなの回答 （1） 専門家の回答 質問者が選んだベストアンサー ベストアンサー lamb1204 ベストアンサー率56% (18/32) 2007/01/04 11:21 回答No.1 DNAの使用目的に合った溶液で薄めてください。 例えば、PCR（特にシークエンスする場合など）に使う場合は、DNA polymeraseの適切な活性に必要なMg++をキレートしてしまうEDTAを含むのでTEはお勧めできません。逆に、ただ保存する場合などであればTEのほうがDNAは安定です。水で薄める場合は、可能ならばddH2Oを滅菌して（sterile deionazied distilled water）使用してください。 質問者 お礼 2007/01/06 20:04 早速の回答ありがとうございます。論文の中に250μg/ml程度のＤＮＡを使用してとあったのでddH2Oで薄めてみようと思います。 広告を見て全文表示する ログインすると、全ての回答が全文表示されます。 通報する ありがとう 0 カテゴリ 学問・教育自然科学生物学 関連するQ&A ＤＮＡの濃度を上げる方法 私はDNAの大量培養をする際にキアゲンのHispeed plasmid midi kitを使用しています。その際に得られるDNAの濃度がいつも薄くて困っています。トラブルシューテイングなどを読みましたがよくわかりません。濃度が濃かったらTEを入れて調製するということを先輩から聞きましたが、濃かった場合は使いたい濃度になるように計算してその量をいれるいうことでした。なにか濃度を上げる簡単な方法（入れる溶液など）があれば教えていただきたいと思っています。よろしくお願いします。 ゲノムDNA溶液を冷凍保存する際のDNA濃度 抽出したゲノムを冷凍保存する予定でいます。 ただ、高分子DNA溶液を凍結保存する際は、濃度を低くしすぎない事と、 凍結融解を繰り返さない事が大事だと教科書に書いてありました。 エタ沈後のゲノムDNAのペレットを100μlのTEで溶解した後、その溶液から 6μlを取って10倍希釈したサンプルを分光高度計で計測した結果、DNA濃度は1100μl/mlでした。 貴重なサンプルなので、ある程度希釈して溶液量を増やして、そして数十μlほどに小分けして冷凍保存、という事を考えています。 ただ、実際にゲノムDNAなどの高分子DNA溶液を冷凍保存する場合、どの 程度の濃度まで希釈してもＯＫなのかという事がわかりません。 どなたかアドバイスいただければ幸いです。よろしくお願い致します。 DNAの変性と塩濃度の関係について 『溶液中の塩濃度を下げるとＤＮＡが変性しやすくなる』と生化学の本には書かれていますが、なぜそういった現象が見られるのでしょうか？ 天文学のお話。日本ではどのように考えられていた？ OKWAVE コラム DNAの溶解について BACのDNAをアルカリ法で精製していますが、ペレットをエタノールで洗浄した後TEに溶解すると、溶液が白濁（というか粘性のある白い沈殿？）してしまいます。 これはDNAが濃すぎて溶解していないからでしょうか？ それとも何らかの雑菌が入ってネバネバしているのでしょうか？ ちなみに、これをそのまま泳動してみると、ウェルに白いものが汚く残ってしまいます。 あと、溶解している液は0.1TEなのですが、TEと0.1TEでDNAの溶解度は違ったりするのでしょうか？ 初心者で、たくさん質問してしまってすみません。 ご回答よろしくお願いします。 DNAが消えた！ 組織からDNAを採取し、フェノール→フェノクロ→クロロフォルム処理→エタ沈で回収したDNA（DNA(1)）がちょっと薄かったので、クロロフォルムに残った層から再度回収して（DNA(2)）、最初のDNAに混ぜました（DNA(1)＋(2)）。volumeを減らして濃度を濃くしたかったため、再度エタ沈したところ、DNAがなくなってしまいました（泣）(1)と(2)は濃度を測定して50ng/ul前後ありました。しかし、(1)＋(2)は100ng/ulぐらいはあるはずが、0.1ng/ulしかないんです。最後のエタ沈は、TEと1/10量の3M酢酸ナトリウム、2.5倍量のエタノールを入れて混ぜ、-80℃15分、遠心12000rpm 30minしました。70%EtOHでリンスする時に遠心機利用が他の実験者とバッティングしたため、10分くらい70%EtOHを入れたままおいてしまいましたが、4℃12000rpm10min遠心して乾燥させ、TEに溶解しました。DNAが回収できなかったのは、どこがいけなかったんでしょうか？ 吸光度を用いたDNA濃度の計算についての質問です。 精製したDNA溶液(原液と呼称)20μlから、2μlを取り出してミリQ水198μlと併せて100 倍希釈溶液200μlを作成しました。 2(μl)+198(μl)=200μl(μl)・・・① この100倍希釈溶液を分光光度計を用いて波長260nmで測定したところ、A260=1.466という値が出てきました。 DNA濃度を求めるために以下の式で計算したところ、濃度が求められました。 1.466(A260)×50(ng/μl)×100(希釈率)＝7330(ng/μl)・・・② ここまではよかったのですが、少し混乱してしまいました。 ②の7330(ng/μl)という濃度は、①にて100 倍希釈する際に加えた2μl中の濃度でしょうか？ それとも原液全体の濃度でしょうか？ とても初歩的な質問で申し訳ございません。 濃度計算が苦手な私にご回答いただける方がいらっしゃいましたら、幸いです。 どうぞよろしくお願いいたします。 吸光度を用いたDNA濃度定量法について DNA溶液のAbs=260nm、280nm、320nmの波長を測定し、DNAの濃度定量を行ったですが、Abs260/Abs280の値が1.7より低く、DNAの純度があまり高くありませんでした。この場合、従来の吸光度計算（Abs260の値×50 ug/ml×希釈倍率）で精度の高いDNA濃度計算結果が得られるのでしょうか? DNA純度が低い場合の吸光度でのDNA濃度定量法があれば教えてください!! DNA濃度を高くしたい 20-40 ng/μL のDNA溶液を100 ng/μL にしたいのですが、エタノールのみで沈殿させることは難しいでしょうか。3M酢酸ナトリウムや塩化ナトリウムなど塩も共に加えた方がいいのでしょうか。方法なども教えていただけたら嬉しいです。宜しくお願い致します。 DNAの濃縮方法、分離&精製方法 300ulの溶液中に5ngのDNAが溶解しています。 このサンプルを使って、Whole genome amplificationを行ったところ、DNA濃度が低すぎるため、反応が上手く進みません。そこで、水分を蒸発させ、DNA濃度を高めて反応にかけたところ、今度は溶液中の成分が濃縮されていることが原因で、反応が上手く進まなくなりました。（ここで挙げている原因に間違いはありません。別な実験で確認を行っています） そこで質問は「溶液中のDNAだけを濃縮させる方法」を教えてください。ただし貴重なサンプルなので、極力DNAのロスは避けたいと思っています。ですので、エタノール沈殿法、シリカゲルを用いたカラムによる精製法などは避けたいと考えております。よろしくお願いします。 DNA抽出の際のゲル化について 植物のゲノムDNAの抽出を行っています。 ところが、最後のエタ沈の段階でDNAがゲル化し、 溶けにくくなって困っています。 （濃度の高いDNA溶液を作りたいため） 方法はCTAB、SDS共試してみましたが、同じようにゲル化してしまいました。 何かいい方法はないでしょうか？ 電気泳動DNAシークエンシングのサンプル濃度(蛍光標識) 私は，レーザーの研究をしている学生です．化学やバイオでは全くの素人です． 現在，私の作製したレーザーを電気泳動DNAシークエンシングに応用することを考えています．蛍光標識したDNAに私の作製したレーザーを照射して蛍光を測定する実験を予定しています．即ち，装置を作るエンジニア側からの質問です． そこで知りたいことは，実際に電気泳動DNAシークエンシングでは，ゲル中でどれくらいの濃度のサンプル(DNA，標識色素)を測定しているのかということです． １，泳動するDNAの濃度(泳動中のゲルの中での濃度)はどれくらいのオーダーなのでしょうか？ ２，DNAひとつに対して標識蛍光分子はひとつだけ結合するのでしょうか？ 泳動の前処理でのDNAの濃度は 0.数μg/μLにする等という説明を見たことがありますが，DNA数濃度では何個/L程度になるのでしょうか？DNAの質量は長さで全く異なるのではないのでしょうか？ できればmol/Lで知りたいです． 些細な情報でも構いません．よろしくお願いいたします． ＤＮＡの水溶性 水溶性高分子として知られている鮭白子由来ＤＮＡを使用しているものなのですが，水に対して1wt%，2wt%になるように溶解したとき，白色透明の溶液になってしまいますが，これは完全に溶解していないことになるのでしょうか？濃度が濃すぎるのでしょうか？ 日本史の転換点？：赤穂浪士、池田屋事件、禁門の変に見る武士の忠義と正義 OKWAVE コラム プラスミドＤＮAの吸光度からモル濃度を求める 吸光度からモル濃度を求める方法がこんがらがってしまいよくわかりません。 どなたか以下の問題をお願いします。 ６×１０の３乗の塩基対のプラスミドDNAの吸光度がＡ２６０＝０．２４のとき、モル濃度はいくらでしょうか。 （DNA中のヌクレオチドの平均分子量は３３０・１ｍｇ/ｍｌの濃度のDNAはＡ２６０＝２０） ※３乗の表し方がわからずすみません できれば計算過程もよろしくお願いします。 高濃度コラーゲン溶液の濃度測定法 高濃度（3mg/ml）以上のコラーゲン溶液の濃度を測定するのには、どういった方法があるのでしょうか。 一般的なタンパク質定量法では、調べた限りでは、低濃度（～1mg/ml）までしか測定できなそうなのですが・・・（素人なので勘違いかもしれませんが）。宜しくお願いします。 高濃度コラーゲン溶液の濃度測定法 高濃度（3mg/ml～）以上のコラーゲン溶液の濃度を測定するのには、どういった方法があるのでしょうか。 一般的なタンパク質定量法では、調べた限りでは、低濃度（～1mg/ml）までしか測定できなそうなのですが・・・（素人なので勘違いかもしれませんが）。宜しくお願いします。 濃度調整 レーザープリンターDCP-L2540DWを使用しています。印刷濃度調整のプリンター設定のチェックボタンを外し濃くして→Ok としても、他のエクセルシートなどを印刷する時、濃度調整の「プリンター設定のまま」になってしまいます。解決方法を伝授願います。 ※OKWAVEより補足：「ブラザー製品」についての質問です。 濃度について ５％グルコース溶液の考え方について教えて下さい。 １Lのグルコース溶液を作るようにいわれた時、グルコース５０ｇ＋水９５０ｍｌでは違うといわれました。この作り方と１Lメスフラスコで作った時の濃度の違いを教えて下さい。また後者の濃度を作りたいときメスフラスコを使わずに作ることはできるのでしょうか。よろしくお願いします。 高濃度コラーゲン溶液の濃度測定法 ジャンルが違うかもしれませんが、 高濃度（3mg/ml）以上のコラーゲン溶液の濃度を測定するのには、どういった方法があるのでしょうか。 一般的なタンパク質定量法では、調べた限りでは、低濃度（1mg/ml）までしか測定できなそうなのですが・・・（素人なので勘違いかもしれませんが）。宜しくお願いします。 DNAの等密度遠分離法について 塩化セシウムを使ったDNAの等密度遠分離法の説明の中で，塩化セシウム溶液を高速で遠心分離すると，自然に濃度勾配が生ずることを利用しているとありました。 質問は，この「自然に」という点です。均一に混ぜ合わさった塩化セシウム溶液を高速で遠心分離すると溶液中に濃度差ができるということなのでしょうか。それは物理的にどのような現象なのでしょうか。 あまり混ぜていない塩化セシウム溶液を遠心分離すると密度によって層に分かれるというのなら分かりますが。 それとも，遠心分離器中のの回転半径の大きさで，重力が違いますが，飽和濃度が重力の大きさに影響するなんてことがあるのでしょうか。 また，高速とはどのくらいなのでしょうか。 以上よろしくお願いします。 精液からのDNA抽出について 血液や精液からDNAを抽出しPCRをしています。 キットを使わずProteinase K 処理後はフェノクロ→エタ沈して ペレットをTEに溶かしています。 精液から抽出したDNAの濃度が血液由来のものと比較してかなり 低いのですが、これは普通なのでしょうか？ 血液由来のDNAは150ng/μl前後なのですが、精液由来のものは 10ng/μl前後です。 最初に用いるサンプル量は250μlほどで、最後はTE100μlに 溶かしています。 ご存じの方がいらっしゃいましたらご回答お願いいたします。 注目のQ&A 「You」や「I」が入った曲といえば？ Part2 結婚について考えていない大学生の彼氏について 関東の方に聞きたいです 大阪万博について 駅の清涼飲料水自販機 不倫の慰謝料の請求について 新型コロナウイルスがもたらした功績について教えて 旧姓を使う理由。 回復メディアの保存方法 好きな人を諦める方法 小諸市（長野県）在住でスキーやスノボをする方の用具 カテゴリ 学問・教育 自然科学 理科（小学校・中学校）化学物理学科学生物学地学天文学・宇宙科学環境学・生態学その他（自然科学） カテゴリ一覧を見る OKWAVE コラム 突然のトラブル？プリンター・メール・LINE編 携帯料金を賢く見直す！格安SIMと端末選びのポイントは？ 友達って必要？友情って何だろう 大震災時の現実とは？私たちができる備え 「結婚相談所は恥ずかしい」は時代遅れ！負け組の誤解と出会いの掴み方 あなたにピッタリな商品が見つかる！ OKWAVE セレクト コスメ化粧品 化粧水・クレンジングなど 健康食品・サプリ コンブチャなど バス用品 入浴剤・アミノ酸シャンプーなど スマホアプリ マッチングアプリなど ヘアケア 白髪染めヘアカラーなど インターネット回線 プロバイダ、光回線など
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早速の回答ありがとうございます。論文の中に250μg/ml程度のＤＮＡを使用してとあったのでddH2Oで薄めてみようと思います。