DNA濃度を高くしたい

質問

20-40 ng/μL のDNA溶液を100 ng/μL にしたいのですが、エタノールのみで沈殿させることは難しいでしょうか。3M酢酸ナトリウムや塩化ナトリウムなど塩も共に加えた方がいいのでしょうか。方法なども教えていただけたら嬉しいです。宜しくお願い致します。

回答No.1

Dr_Hyper

色々方法はあります。
ただ情報が少なすぎでどれが最適なのか、おすすめができません。
どんな環境で、トータルどのくらいの量があるのか、どのような設備があるのか。
濃縮後の状態はどのようなものが望ましいのか。

例えば分子生物学の研究室で、PCRのtemplateに100ng/ulにしろと書いてあるけど
というなら、水を加えているなら、その水を減らして入れればいい
みたいなことなのか、遠心機はあるのかとか、分子生物学の研究室にしてはNaOAcやNaClを加えないようなことを教えられているなら不思議ですし、ちょと的外れになるかもしれません。

１　エタ沈
エタノール沈殿は、技術さえしっかりしていれば最も回収効率が良い方法です。
ただ、あなたの言っているように　必ず　塩　が入ります。
塩を加えて沈殿させるために、その後70%　エタノールで脱塩操作をするのが望ましい。

２　カラム精製
どこかの研究室に属しているのであれば、DNA精製用のカラムで精製し、溶出の際にできるだけ少量で溶出すれば濃縮はできます。
技術はいらないけど、微量高速遠心機などの機器が必要となります。

３　非常に少量であれば、吸引乾燥機のようなものがあれば、水分を半分飛ばせば、濃くなります。この方法は不純物や塩も濃縮されるので一般には推奨されないけど、使用目的によっては一番簡単に濃いDNAが手に入る。
でも、あまりにもトータル量がすくないとチューブのヘリに乾燥してついてしまってなくなってしまったなどもあるかもしれません。

お礼

ありがとうございます。説明不足で申し訳ありません。自分でも調べてみてエタノール沈殿が最適と思ったのでそれでやってみます。