MTT AssayのStop Solution

質問

MTT Assayについての質問です。
実験方法は、培地にMTTを添加し、37℃,4h後にStop Solutionを入れて、A570nmで測定しています。
この時使用するStop Solutionのレシピがわからなくて困っております。一応、以前いらっしゃた方のレシピが、10mM HCL + 10%SDSとなっているのですが、MTTが溶解しません。顕微鏡で見ると、3割程度の面積なので、細胞数が多いとは考えられません。
どなたか、良い方法をお教え頂けると嬉しいです。

回答No.1

Dr_Hyper

MTT自身は水溶性で黄色の溶液ですが、脱水素酵素による反応によって、MTTとNADHの間に酸化還元反応が起こり、MTTがFormazanに還元されます。おそらくFormazanはDMSOによく溶けますので、DMSOをダイレクトに入れるか、stop solutionで細胞溶解を行った後、DMSOを加えるのがいいのではないでしょうか。「MTTが溶解しません」を間違って理解しているかもしれませんので、もしそうであれば補足してください。

お礼

早速のアドバイス、ありがとうございました。
先日、DMSOを添加するという手技を試してみましたところ、溶解しました。大変、ありがとうございました。