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DNA抽出
マイクロサテライトマーカーを用いたPCR法で2種類のイネのDNAバンドサイズを測定しました。2種類を6つずつ、全部で12サンプルのバンドサイズを測定しました。しかし、12サンプルの内の2サンプルだけ、バンドが現れませんでした。12サンプル同時に作製したので、手順の間違いは無かったと思うのですが…。。。 しかし、サンプルがでなかったのですから、なんらかの失敗があったことはまちがいないのです。 もしかしたら、DNA抽出時に2種類のサンプルがコンタミしてしまったのか、と考えたのですが…。自信も根拠もありません。 どのあたりで失敗したのか、 見当がつく方、どうか助言していただきたいです。
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抽出したサンプルを泳動してみましたか? 抽出の失敗かPCRの失敗かはそれで確認できます。 ただ、コンタミによってバンドが出ない、とは考えにくいと思います。コンタミしたら出てはいけないバンドが出ることになるでしょう。 抽出に成功していることが確認されたなら、プライマーの設計上、バンドが出ない可能性を秘めていたのかも。プライマーの設計に問題があったのか、バンドが出ないということ自身を成果と見なすか、ということです。