0.5M phosphate (pH8.5)

質問

とプロトコールに有りました。酢酸でタンパクを溶出した後、中和に用いるバッファーなのですが、pH8.5のphosphate bufferはどのように調製したらよいですか？たいていの場合Na phosphateを用いるときはpH8.0位までですよね？pH8.5のphosphate bufferの調製方法教えてください。宜しくお願いします。

回答No.3

geneticist12

>リン酸2水素ナトリウムのpHが約9.2なので、0.5 M リン酸2水素ナトリウムを、0.5 M リン酸水素2ナトリウムで滴定していけば0.5 M phosphate pH 8.5を作ることはできると思います。

逆でした。正しくは、

リン酸水素2ナトリウムのpHが約9.2なので、0.5 M リン酸水素2ナトリウムを、0.5 M リン酸2水素ナトリウムで滴定していけば0.5 M phosphate pH 8.5を作ることはできると思います。

回答No.2

geneticist12

0.5 M のリン酸2水素ナトリウム（またはカリウム）と0.5M のリン酸水素2ナトリウム（またはカリウム）を適当な比率でまぜて目的のpHにします。
どの比率でどのpHになるかは、生化学、分子生物学などの教科書、実験書、あるいは理科年表や試薬会社の資料などで見つけられるかもしれません。

ちなみに、私の手元に資料では、0.1 M リン酸ナトリウムバッファーは、
0.1 M リン酸水素2ナトリウム　93.2 mL
0.1 M リン酸2水素ナトリウム 6.8 mL
でpH 8.0で、それ以上のpHは出ていません。

リン酸2水素ナトリウムのpHが約9.2なので、0.5 M リン酸2水素ナトリウムを、0.5 M リン酸水素2ナトリウムで滴定していけば0.5 M phosphate pH 8.5を作ることはできると思います。

回答No.1

pen82

濃度を調製したNa phosphateなどの溶液を、NaOHでpH8.5にすることは可能だと思います。
しかし、リン酸バッファーはpH8以上では緩衝能を持ちませんので、
この溶液はバッファーとは呼べないと思いますが。

お礼

で・で・ですよね～。pH8.5のリン酸バッファーなんて初めて聞きましたもん。やっぱり緩衝能無いですよねっ！中和目的のプロトコールなのに・・・。でも、上司が良いって言ったから作ってみました。Na2HPO4・12H2Oを溶かした時点でpH計ってみたら8.9でした。これも初めて知りました。とにもかくにもご返答有難うございました。