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緩衝液の入った移動相の処置
逆相で液クロをやっています。 緩衝液(リン酸)を入れた移動相を使ったのですが、カラムの中に緩衝液が入っているとよくないから、有機溶媒の比率が高い移動相でカラムを洗浄しておいたほうがいい、という認識は合っておりますでしょうか? よろしくお願いします。
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カラムの中にリン酸が無い状態で緩衝液に溶かしたサンプルを投入し、リン酸の無い移動層を流した もしくは カラムの中にリン酸が無い状態で緩衝液に溶かしたサンプルを投入し、リン酸入りの移動層を流した ということでしょうか? 緩衝液を移動層に入れるのはpHを一定に保つためですよね? カラムの中にリン酸が無い状態だとカラムの位置によってpHが変化していくように思います。それは本意でしょうか? 実験前に何か残っているとよくないので他の移動層で洗ってから使うことはよくあると思います。 実験後に洗うのでもうなずけます。 しかし移動層を途中(サンプル投入時点?)から変えるのだとすると10年前にクロマトを扱う研究室に在籍したものからすると問題が複雑になるだけでよいことが無いように思えます。 「カラムの中に緩衝液が入っているとよくない」の意味するところがリン酸がカラムに悪影響を与える というのであれば緩衝液から考え直すべきでしょう。
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