ベストアンサー 合成培地の沈殿 2011/11/18 08:20 合成培地の沈殿について質問です。 培地を作った時には物質がちゃんと混ざり合っているのですが、 オートクレーブにかけると培地の一部が試験官の底に沈殿します。 この原因は何なのでしょうか。 みんなの回答 (2) 専門家の回答 質問者が選んだベストアンサー ベストアンサー Dr_Hyper ベストアンサー率41% (2484/6033) 2011/11/21 18:11 回答No.2 残念ながら私も培地が何の培地で、どのような組成なのか分からないと正確にはお答えできませんが、 オートクレーブによって、水分が多少蒸発してしまって、組成の濃度が上昇し飽和した場合や、培養細胞の培地の中にはpHをあわせてからオートクレーブすると沈殿してしまうために、pHを酸性に保持したまま滅菌し、その後適正のpHに補正する物もありますね。 後者のほうは添付の説明書に記載されていると思います。 広告を見て全文表示する ログインすると、全ての回答が全文表示されます。 通報する ありがとう 0 その他の回答 (1) v-flex ベストアンサー率52% (19/36) 2011/11/18 08:37 回答No.1 どの培地組成かわからないと何とも言えないのでは・・・ 有名な培地では、そのあたりも考慮して記載されているはずですし、 元々、沈殿も想定内の培地もあると思います。 (注意書き等に記載があるかと。) 例えばアルブミンなどのタンパク系は熱で沈殿し易い 尿素は加熱によりビウレットやシヤヌル酸に重合したり あとは、時間経過によりCa,Mgがリン酸と反応してしまったか(他のイオン組成にもよるかと) 成分によっては、時間経過や保存状態により劣化してしまっている可能性もあります。 また、従来のオートクレーブ滅菌ではなく、常温ろ過滅菌や、 間断殺菌、別々にオートクレーブなんてのもあります。 まずは組成か培地名もしくは、主成分などを明らかにしないと何とも言えないところです。 広告を見て全文表示する ログインすると、全ての回答が全文表示されます。 通報する ありがとう 0 カテゴリ 学問・教育自然科学生物学 関連するQ&A 培地の作り方 マリンブロスとマリンアガーで液体培地と寒天培地を作ろうと思います。培地は、いったんオートクレーブするのでしょうか。 オートクレーブをした後、静置しておくと液体培地の方は沈殿物が見られ不安です。 ご存知の方はこれらを使った培地の作成方法を教えてください。 合成培地と複合培地について こんにちわ。培地についての質問ですが、合成培地と複合培地の特徴と欠点、コロニーのでき方を教えてください。もしくはそれらを調べることができるサイトなどを教えてください。宜しくお願いします。 グルコース含有培地の保存について グルコースを培地と一緒にオートクレーブにかけて滅菌すると、メイラード反応により褐色の物質が 生成されてしまうという事なのですが、他の成分をオートクレーブにかけ、後からグルコースを加えた培地は保存して後に使う事ができるのでしょうか? その都度作らないといけないのでしょうか? 天文学のお話。日本ではどのように考えられていた? OKWAVE コラム MS培地をオートクレーブにかけるとpHが下がります タイトルの通りです。 MS培地(2,4-D入り)を作り、pHを5.8に合わせた後、オートクレーブにかけました。 その後、念のためにと、pHを測定してみたところ、pH4.6にまで下がっていました。同じ事を繰り返したのですが、やはり同様の結果です。 pHを測定する際の温度は同じ室温にしていますし、オートクレーブ後に劇的に液量がかわったりはしていません。 通常は培地作製時にpHを合わせたら、オートクレーブ後に測りなおすことは今までありませんでした。もしかして、MS培地はオートクレーブするとこのくらいpHが変わるものなのでしょうか? MS培地について MS培地の調整の際、水酸化ナトリウムをPH調節のために入れると沈殿が起こります。原因は何でしょうか?だれか教えてください。 高層培地の作り方 高層培地を作製したのですが、日がたつにつれ寒天が試験管の底から上がってきます。培地をいれた後に何かを加えるのでしょうか。基本的なで申し訳ないのですが 実験書などに載っていないのでご存知でしたら教えて下さい。 M-エンドウ培地について 学生実験で大腸菌群の定量試験を行っています。 その際、メンブレンフィルター法の時に使用する M-エンドウ培地を調製すると、必ず沈殿ができてしまいます。 調製方法は、4.8gを量りとり2mlのエタノールと98mlの水で 加熱して溶かしています。 何度やっても沈殿が出来てしまうので、こうゆう培地なのかとも 思うのですが、どうなのでしょう? それとも、私の調製方法が悪いのでしょうか? ご存知の方がいらっしゃいましたら、教えてください。 要らない培地の廃棄法 うちの研究室では要らなくなった培地を廃棄する際,シャーレからスパチラ等を用いて寒天部分のみを取り出します. その寒天部分のみをオートクレーブ滅菌して排水口に流すんですが,いちいちシャーレと寒天培地を分けていたら2度手間だと思うんです. 先輩はこのやり方で統一してるんですが,寒天培地がシャーレと一緒になったまま(つまり何もしないまま)一気にオートクレーブ滅菌すれば良いと思いませんか?結局分けたシャーレもオートクレーブしますし….高熱滅菌により液体になった培地の中からシャーレを回収するのは確かに面倒ですが,排水口には当然流れないんですから,その時シャーレを回収すれば良いですし(潔癖なひとは嫌かもしれませんけど). 不衛生なやり方ならやりませんが,現在ゼミの先生が出張中なので相談ができません.ご意見をいただけますと嬉しいです.よろしくお願いしますm(__)m 沈殿の理由 高校無機化学での質問なんですが、 沈殿する物質と沈殿しない物質は何が根本的に異なっているのでしょうか? (例えば、CrO4 2-ではAg +は沈殿するがCu 2+はしない等) また、沈殿しても過剰に加えれば錯イオンになったりすることもありますが、これはどういう仕組みなんでしょうか? 沈殿の原因を知りたいです。 いま培地を作っているのですが、沈殿が生じてしまい困っています。 1Lあたりの組成が KNO3 200mg MgSO4 100mg K2HPO4 52mg CaCl2 54mg FeNaEDTA 10mg いずれも一種類での溶解度としては全く問題ない筈ですが、これらを混合して培養液にすると、白い沈殿が生じてしまいます。この原因を知りたいのです。お願いします。 培地が青色になる こんにちは。 ご存じの方がおられましたらお教え願いたいです。 微生物の培養をしているのですが、 ある検体の試験管の培地が青く変色していました。 培地はペプトンとNaClとグルコースぐらいの シンプルなもので指示薬などは入っていません。 微生物が産生する物質で青に呈色する物質には どのようなものがあるのでしょうか? ちなみに検体に油が含まれています。 よろしくお願い申し上げます。 何だかいろいろな化学物質は川を流れていくうちに底の方に沈殿していくと思 何だかいろいろな化学物質は川を流れていくうちに底の方に沈殿していくと思うのです。 そういった意味で、淀川の底に住んでいるようなウナギは食べないほうが良いのでしょうか? 日本史の転換点?:赤穂浪士、池田屋事件、禁門の変に見る武士の忠義と正義 OKWAVE コラム 培地の滅菌について教えてください。 微生物の培地についての質問です。 以下の成分の培地を作り、オートクレーブ滅菌しました。 Glucose/ Polypepton/ Meat extract/Yeast extract/Trace metal solution / Tween 80 solution/ Sodium acetate・3H2O/ NaOH 滅菌後のグルコース濃度を酵素法で測定したら、 培地を作った時(つまり滅菌前)のグルコース濃度より 高い濃度になっていました。 これは、実験の誤差(実験の操作に問題があった等)ということなのでしょうか? 理論的には、グルコース濃度は滅菌前より滅菌後の方が、少なくなるものなのでしょうか? それとも今回の結果のように、多くなることも理論的に考えられるのでしょうか? グルコース以外の培地の成分から考えても(上記の成分なので多糖類なども恐らく含まれていないと思いますし)、滅菌によってグルコースが増えるということはあり得ないように思うのですが・・・ 色々考えてみましたが、滅菌中にどのような反応が起こっているのかが良くわかりません。 どなたか教えていただけないでしょうか。 マンニット食塩カンテン培地とセトリミドカンテン培地の培地性能試験について 初めて質問にさせていただきます。 私は医薬品の検査を行っている部署に勤めており、現在微生物限度試験方法を日局15第1追補に変更するためのバリデーションを行っています。 質問はマンニット食塩カンテン培地とセトリミドカンテン培地の培地性能試験についてです。 日局15第1追補では特定微生物の培地性能試験の項目が発育促進特性、鑑別特性、選択特性の3つになりました。 このうち発育促進特性では規定された最短時間以内で培養すると書かれています。 マンニット食塩カンテン培地とセトリミドカンテン培地の場合はどちらも18~72時間と規定されているため、 18時間以内で判定することと思われます。 しかし、弊社で日局15第1追補準拠の市販生培地を購入して試験を行ったところ、 18時間では発育を確認することが困難でした。 そこで、複数メーカーの生培地等を購入して比較試験を行いましたが、 やはり同じような結果であり、 培養時間を42時間以上とするのが妥当であるという結論に達しました。 そこで、弊社では実際の製品試験も培養時間を42~72時間と規定しようと計画していますが、 これは問題ないことと考えていいのでしょうか? 宜しくお願いします。 MS培地 培地を作製した時にはなかったのに、MS培地の底(表面まではでてきてません)に気泡のようなものができていました。シロイヌナズナの種子を播いているのですが、このまま生育させても大丈夫でしょうか? ちなみに昨日種まきをした時点では見られませんず、1日人口気象機にいれておいたところ発生しました。 培地の滅菌の仕方【シリコン栓を使うとき】 お世話になります。 基本的なことだと思いますが、確認したく投稿します。 試験管に培地を入れ、滅菌するとします。 私が学生の頃は試験管に培地を入れ、シリコン栓をはめ、 一本一本のシリコン栓にアルミを巻いて、オートクレーブした後 しばらく(半日~1日)おいて、その後に菌を接種して使用していました。 しばらく置く理由としてはシリコン栓を乾かすため、と習いました。 濡れているとコンタミするからと。 しかし、調べてみるとアルミを巻く理由は水滴が入らないようにするためと出てきます。 で、あれば乾かす必要はなく、滅菌後、培地が冷えればすぐ使えるような気がします。 また、アルミで覆う必要もないような気もします。蒸気はアルミを巻いても巻かなくも入ってくるように思いますし・・・ 冷えたときに上からポタポタ落ちるかもしれない水滴から守るためだけであれば、巻かずとも上に屋根の様にアルミを被せておけば良いような気もします。 本当のところはどうなのでしょうか? 最少培地の問題の考え方 アカパンカビの変異体にアルギニン要求性株がある。これは最少培地では生育できず、アルギニンを培地に添加することが必要な株である。アルギニンは 前駆物質 → オルニチン → シトルリン → アルギニン の段階を経て合成される。アルギニン要求株は3種類あるが、それぞれどの酵素が欠損し、何を培地に加えれば生育可能か。 という問題がありました。 それぞれ、酵素が 1. 前駆体→オルニチンを合成する酵素が欠損した場合 2.オルニチン→シトルリンを合成する酵素が欠損した場合 3.シトルリン→アルギニンを合成する酵素が欠損した場合 という考えの元、私は解答を 1ではオルニチンを 2ではシトルリンを 3ではアルギニンを最少培地に付加すれば育成できるとしました。 しかし、解答では 1ではオルニチン、シトルリン、アルギニン 2ではシトルリン、アルギニン 3ではアルギニン となっていました。 考えてみればいつも逆の問題(つまり、表を見て合成していく過程を検討する問題)では上記のような条件であれば前駆体からアルギニンに合成される順を考察できるのでそうだなぁ。。。とおもいましたが、 そもそも、ここでものすごくもやもやする疑問がわきました。 たとえば1の場合ならば前駆物質からオルニチンの合成が無理なだけである。 当然、オルニチンからシトルリンに変換する酵素は別物でこいつは正常なのですよね? だったらオルニチンさえ加えればそれがシトルリン、それがアルギニン となるのでシトルリンとアルギニンを加えなくてもいいんじゃないのか? というどうしても自分で解答した考えを正しいと主張したくなってしまいました。 しかし上記のとおり逆の問題を考える場合ではこの考えは当てはめることができなくなるので否応なく認めざる得ないと考えて問題を先にすすませましたがやはり腑に落ちません。 どうして一酵素が欠損しているだけなのに次の反応に関与する産生物まで付加しなければならないのでしょうか。 アカパンカビに聞きたくても答えてくれません。 どうかご指導の程お願い申し上げます。 TX-100液体培地は水に流してはいけない? TX-100液体培地にバクテリア(種類や名前はわからないです)を植菌して培養し、ガスクロマトグラフィー分析用のサンプルを抽出しました。 そして、「残った培養液は流しに捨ててはいけないのはなぜ?」と先生から質問されました。 自分は、「培養したバクテリア等が残っているため危険だから。」と思ったのでそう答えました。 しかし、「それもあるけど、それじゃあオートクレーブにかけたら菌類はみんな死滅するけど、この状態でも捨ててはいけないんだよね。じゃあそれはなんで?」と返されて答えられませんでした。 中身のサンプルが問題ではない・・・ということは培地として使用したTX-100液体培地に原因があると思ったのですが、何がいけないんでしょうか・・・?そこがわからず困ってます。 個人的にはTX-100中の主成分である界面活性剤トリトンX-100が水中の生物を死滅させてしまう可能性があるから?と考えたのですが・・・。イマイチ確証が持てる資料や参考文献が見つからずといったところです。 プロピオン酸ナトリウムの滅菌法 PGY培地に抗生物質としてプロピオン酸ナトリウムを入れたいのですが、オートクレーブをしても大丈夫なのでしょうか?? SOC培地 プラスミド合成についての質問です。 カナマイシン耐性プラスミドを増やす場合、カナマイシン含有プレートにまく前にSOC培地でコンピテント細胞を30-45分培養する必要があるのはなぜでしょうか? 宜しく御願い致します。 注目のQ&A 「You」や「I」が入った曲といえば? Part2 結婚について考えていない大学生の彼氏について 関東の方に聞きたいです 大阪万博について 駅の清涼飲料水自販機 不倫の慰謝料の請求について 新型コロナウイルスがもたらした功績について教えて 旧姓を使う理由。 回復メディアの保存方法 好きな人を諦める方法 小諸市(長野県)在住でスキーやスノボをする方の用具 カテゴリ 学問・教育 自然科学 理科(小学校・中学校)化学物理学科学生物学地学天文学・宇宙科学環境学・生態学その他(自然科学) カテゴリ一覧を見る OKWAVE コラム 突然のトラブル?プリンター・メール・LINE編 携帯料金を賢く見直す!格安SIMと端末選びのポイントは? 友達って必要?友情って何だろう 大震災時の現実とは?私たちができる備え 「結婚相談所は恥ずかしい」は時代遅れ!負け組の誤解と出会いの掴み方 あなたにピッタリな商品が見つかる! OKWAVE セレクト コスメ化粧品 化粧水・クレンジングなど 健康食品・サプリ コンブチャなど バス用品 入浴剤・アミノ酸シャンプーなど スマホアプリ マッチングアプリなど ヘアケア 白髪染めヘアカラーなど インターネット回線 プロバイダ、光回線など