細胞数の計算

質問

ラットの脾臓を無菌的に取り出し、ＦＣＳを含むＲＰＭI1640培地で細胞浮遊液を5mL調整した。
この中の生細胞濃度を知るために、細胞浮遊液1mLをとり、遠心分離機後上清を捨て、400μＬのＰＢＳで細胞を懸濁した。そこから、50μＬとり、同量のトレパンブルー液と混合し、Thoma型血球計算盤の中区画（縦0.2mm,横0.2mm,高さ0.1mm）を観察すると生細胞（ａ）個存在したことから、元の細胞浮遊液中の生細胞数を1×10＾7個/mLであることが分かった。（a）を求めよ。

先輩の答え）
中区画の容積は、0.2*0.2*0.1=4.0*10^(-6)cm^3
中区画1区画あたりの平均の細胞数がＮ個の場合、元の細胞数は
Ｎ/4.0*10^(-6)×100/50×400/1000[個/mＬ]と表せるので、
（a）/4.0*10^(-6)×100/50×400/1000=1×10＾7
よって、(a)=50
となっているのですが、なぜ「中区画1区画あたりの平均の細胞数がＮ個の場合、元の細胞数は
Ｎ/4.0*10^(-6)×100/50×400/1000[個/mＬ]と表せる」のでしょうか。
とくに、100/50や400/1000は何を表しているのでしょうか。

お願いします。

回答No.1

upright · ベストアンサー

N/4*10^(-6)は1cm^3当たりの細胞数(個)
100/50はトリパンブルーによるもの(細胞数を数えるときは、細胞濃度がPBS懸濁時の半分になっている)
400/1000はPBS400μl(400/1000ml)で懸濁したから

つまり、N/4*10^(-6)×100/50=400μlPBSで懸濁時の細胞濃度(個/ml)※1cm^3=1ml
N/4*10^(-6)×100/50×400/1000=400μlPBSで懸濁時の総細胞数(個)=細胞浮遊液1mlの細胞数(個/ml)=1*10^7

お礼

ありがとうございます。
とても参考になりました。